mi polla

PAS (ácido periódico de Schiff):


1.- TÉCNICA:

1.- Desparafinar e hidratar (2 pasos de xilol de 5 min cada uno) (100º→ 5min, 96º→5min y 70º→5min).
2.- Ac. Periódico (nocivo y muy oxidante)1%, 10 min.
3.- Agua corriente 10 min.
4.- Agua destilada tres baños.
5.- R. de Schiff, 15 min.
6.- Agua sulfurosa tres baños:
-Metabisulfito de sodio (tóxico leve) ________ 6,0ml.
-HCl 1N___________________________________ 5,0 ml.
-Agua destilada____________________________100,0 ml.
7.- Agua corriente, 10 min.
8.- Contraste: Verde luz 2 min.o Htx de Harris entre 30 segundos a 1 min.
9.- Deshidratar (70º→2min, 96º→2min, 100º→ 2min), aclarar (2 pasos de xilol de 2 minutos cada uno) y montar.


2.- RECETA DE LOS REACTIVOS:


Ac.peryódico 1%


Agua sulfurosa:
-Metabisulfito de sodio_______________ 6,0 ml.
-HCl 1N______________________________ 5,0 ml.
-Aguadestilada_______________________ 100,0 ml.


-Reactivo de Schiff:
Fucsina básica_____________________________ 1 g.
Agua destilada hirviendo___________________ 200 ml.Se deja enfriar hasta 50 ºC se le añade 20 ml de HCl 1N, se enfria hasta 20 ºC y se le añade 1 g de metabisulfito de sodio y 0,5 g de carbón vegetal (decolorante). Se deja 48 horas en reposo enausencia de luz (se hace incoloro) y se guarda en frigorífico en recipiente pequeño hasta el borde para que no se oxide.


Verde luz o Htx de Harris.




3.- RESULTADOS:

RESULTADOS:Glúcidos
Rojo púrpura
Fondo
Depende del contraste

Fundamento: La técnica de PAS se utiliza en los preparados para microscopía óptica, permite la tinción de componentes celulares que contienenhidratos de carbono, por ejemplo algunas membranas celulares, células caliciformes en la mucosa del intestino, fibras reticulares que están rodeados por hidratos de carbono, etc. Entonces en esta...