MI PROTOCOLO Thaynet

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MÉXICO

FACULTAD DE CIENCIAS
LICENCIATURA EN BIOLOGÍA


DETERMINACIÓN DE ARNm DE RECEPTORES OREXINÉRGICOS EN EL AREA TEGMENTAL VENTRAL Y NÚCLEO ACCUMBENS DURANTE LA CÓPULA REGULADA POR LA RATA HEMBRA

TESIS

Para obtener el grado académico de:
BIOLOGO

Presenta:
Carrillo Flores Nancy Thaynet


Codirectores:
Ulises Aguilera Reyes
Oscar Ricardo Galiciacastillo

Toluca México, 2 de noviembre 2015



I. Introducción
La amplia distribución de ARNm que codifica Orexina-A (OX1-R) y Orexina-B (OX2-R) en el sistema nervioso central (SNC) sugiere que pueden estar implicados en múltiples funcionesvías funcionales. Entre otras cosas, La presencia de Oorexina-A afecta la secreción de la hormona luteinizante dependiente de esteriodes del ovario, lo quesugiere una implicación de la Orexina-A en la regulación de la función reproductiva. Eso no es lo único que hace la orexina-A en cuanto a la regulación de la función reroductiva investiga más cosas. Para investigar el posible papel de la Orexina-A en la función reproductiva, se investigaráan los niveles de RNAm del receptor de Orexina-A (OX1-R) en el área tegmental ventral (VTA) y Núcleo accumbens (Acb)en ratas hembras durante el ciclo estral en el título dices que lo harás durante la conducta sexual mediante PCR en tiempo real.
¿Cuáles resultados? tu aun no tienes resultados Estos resultados sugieren un papel de los receptores de Orexina-A (OX1-R) en la generación de conductas motivas como la conducta sexual de la rata hembra a través de sitios de unión importantes en VTA y Acb.
II.Antecedentes
El sistema orexinérgico formado por las esto ¿por qué está en rojo? orexinas/hipocretinas fueron descubiertas casi simultáneamente por dos grupos de investigación en 1998. De Lecea1 y colaboradores las descubrieron mientras buscaban ARN mensajero (ARNm) que se expresara de forma abundante y exclusiva en el hipotálamo de la rata; esta búsqueda resultó en la identificación de un nuevo ARNm queparecía estar exclusivamente expresado en la región lateral, perifornical y posterior del hipotálamo la cita iría aquí. Basados en la estructura de este ARNm fue determinada la estructura de su prepropéptido, el cual consistió en un péptido señal y sitios de clivaje que sugirieron la existencia de al menos dos productos peptídicos denominados hipocretinas (1 y 2); de la combinación hipotalámico ehipocretincretina. En el mismo año Sakurai2 usando la técnica de la transcripción reversa, descubrieron los mismos péptidos. La técnica de farmacología reversa permite identificar ligandos endógenos de receptores “huérfanos” acoplados a proteínas G. Los genes que codifican dichos receptores se expresan en células transfectadas previamente y luego estas células se usan para detectar sustancias deextractos celulares que puedan ligarse a cada uno de los receptores expresados y activarlos. De esta forma fueron identificadas las orexinas (A y B) (orexis en griego significa “apetito”) como ligandos endógenos para dos receptores huérfanos acoplados a proteínas G. De Lecea, et al. (1998) las llamaron hipocretinas por su parecido con la secretina, mientras que Sakurai, et al., (1998) las nombraronorexinas por su importante participación en la regulación de la ingesta de alimentos.
La Orexina-A (en mamíferos) es un péptido de 33 aminoácidos (Pyr-Pro-Leu-Pro-Asp-Cys-Cys-Arg-Gln-Lys-Thr-Cys-Ser-Cys-Arg-Leu-Tyr-Glu-Leu-Leu-His-Gly-Ala-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Leu-NH2) con dos puentes disulfuro intracadena, un peso molecular de 3562 Daltons (Da), un residuo piroglutamilo en suextremo N-terminal y amidado en su extremo C-terminal (ambas terminaciones típicas en los neuropéptidos), su estructura está completamente conservada entre el humano, rata, ratón cerdo y vaca3.
La Orexina-B es un polipéptido de 28 aminoácidos (Arg-Ser-Gly-Pro-Pro-Gly-Leu-Gln-Gly-Arg-Leu-Gln-Arg-Leu-Leu-Gln-Ala-Ser-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Met-NH2) amidado en su extremo C-terminal de un...