Micaela Elizabeth Gonzalez ProteinasI

Trabajo Práctico Nº1

Determinación de la concentración de proteínas mediante el método colorimétrico de Biuret





Nombre y apellido: Micaela Elizabeth Gonzalez
Comisión: 03
Alacena: 03Objetivo
Determinar la concentración de una solución de ovoalbúmina por un método colorimétrico y espectrofotométrico. Establecer cuidadosamente el protocolo de trabajo.

Materiales y métodos
SegúnGuía de Trabajos Prácticos de Química Biológica 2014.

Resultados

Tabla I: Protocolo de trabajo

Tubo (nº)
H2O (ml)
Solución patrón de albúmina (ml)
Solución de ovoalbúmina (ml)
Reactivo de Biuret(ml)
1-2
2,0
-
-
4,0
3-4
1,5
0,5
-
4,0
5-6
1,0
1,0
-
4,0
7-8
0,5
1,5
-
4,0
9-10
-
2,0
-
4,0
11-12
1,2
-
0,8
4,0

Tabla II: Absorbancias, concentraciones (mg/ml) y masas

Tubo
Absorbancia
Concentración(mg/ml)
Masa (mg)
1-2
0,016
0,014
0,00
0,00
3-4
0,054
0,055
0,13
0,80
5-6
0,083
0,083
0,26
1,60
7-8
0,114
0,117
0,40
2,40
9-10
0,147
0,149
0,53
3,20
11-12 (muestra)
0,110
0,112
2,82
2,88
2,84
2,90Muestra:
Concentración mg/ml promedio: 2,85
Masa (mg) promedio: 2,87
Concentración Molar (M): 6,68 x 10-5
Muestra incógnita: D

Gráfico I


Grafico II


(Se descartan los puntos (0,13; 0,054) y (0,13;0,055))

Conclusiones

En este trabajo práctico se determinó la concentración de una solución de ovoalbúmina mediante el método de Biuret (método colorimétrico), la cual coincidió con la muestra D,analizada por medio de la medición de la absorbancia a 280 nm, a la cual absorben los aminoácidos aromáticos como triptófano y en menor medida tirosina (método espectrofotométrico).
Tanto el métodocolorimétrico como el espectrofotómetro son útiles para determinar la concentración de una proteína, pero en el caso del método de Biuret comparado con el espectrofotométrico tiene baja sensibilidad. Porotro lado, el método colorimétrico utilizado en este trabajo, no depende de la composición de aminoácidos, y hay pocas interferencias, mientras que el otro método sí depende de la composición de...