Micologia Veterinaria

________________________________________________________Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XXI, Nº 6, 477 - 483, 2011

PATOGENICIDAD DÉRMICA DE UN AISLAMIENTO AUTÓCTONO DEL HONGO ENTOMOPATÓGENO Beauveria bassiana EN RATONES
Dermal Pathogenicity of an Autochthonous Isolate of Entomopathogenic Fungus Beauveria bassiana in Mice
María Eugenia Acosta-Quintero 1, Dalmiro José Cazorla-Perfetti 1*,Giovanny Eduarte-Pereira 2 y Pedro Morales-Moreno 1 de Entomología, Parasitología y Medicina Tropical (L.E.P.A.M.E.T.). Centro de Investigaciones Biomédicas (C.I.B.), Universidad Nacional Experimental “Francisco de Miranda” (UNEFM), Apdo. 7403, Coro 4101, Coro. Estado Falcón. Venezuela. E-mail: lutzomyia@hotmail.com. 2Cátedra de Farmacología, Área Ciencias de la Salud, UNEFM. Coro. Estado Falcón.Venezuela.
1Laboratorio

RESUMEN
El objetivo de este trabajo fue evaluar a dosis de 1x109 conidias/mL por vía dérmica en ratones albinos NMRI (machos y hembras), la patogenicidad del aislamiento autóctono LF14 de Beauveria bassiana (Fungi: Ascomycota). Esta especie posee una elevada virulencia hacia Rhodnius prolixus y Triatoma maculata (Triatominae), vectores de la enfermedad de Chagas enVenezuela. Se realizaron observaciones clínicas y de comportamiento diarias y se registró el peso corporal. Asimismo, se estimó el aclaramiento fúngico mediante examen directo y cultivo de muestras de piel y de infectividad con la toma de muestras de tejidos de varios órganos, incluyendo un estudio histopatológico durante las necropsias a los 3; 7 y 14 días después de la inoculación. No ocurrieronmuertes ni alteraciones clínico-patológicas discernibles, siendo el tipo de comportamiento activonormal en el 100% de los casos. El peso promedio corporal ganado, tanto en los animales expuestos a LF14 B. bassiana como los controles, se incrementó con el tiempo, siendo sólo las diferencias entre sexos estadísticamente significativas (F=42,84; g.l.=1; P90% en cámara de ambientación (Biotronette® MarkII, modelo 845, Lab Line Instruments, Inc, Illinois, EUA), como ya se indicó anteriormente [3, 7]. A las 24; 48 y 72 horas se estimó el número de conidias germinadas (%). Una vez concluida la incubación, se cuantificó la esporulación (conidias/mL) mediante hemocitómetro [7]. Se llevaron anotaciones diarias del número de animales que sobrevivieron o fallecieron durante la investigación. Estudiohistopatológico A todos los animales se les realizaron necropsia completa (anatomopatología), detallándose las características externas e internas (órganos y sistemas). Los sacrificios se realizaron (2-3 animales/sexo) en los días 3; 7 y 14 después de la inoculación fúngica, mediante anestesia con éter dietílico, seguida de dislocación cervical. Mediante pinzas y tijeras de disección, se tomaronmuestras de tejidos, incluyendo piel, riñones, hígado, bazo, pulmones, tráquea, estómago, intestinos y corazón. A las muestras obtenidas se les hizo estudio micológico (infectividad) directo y cultivo en medio sólido, como ya se describió anteriormente. Para el estudio histopatológico, una sección de las muestras se fijó en formaldehído al 10% y se incluyeron en parafina para hacer cortes histológicosde 5-7µm con microtomo de rotación (Reichert Jung HN-40, Mannheim, Alemania) accionado manualmente. Los cortes se colorearon con hematoxilina – eosina

(H & E) y/o azul de toluidina, y se evaluaron y fotografiaron (Olympus, Fe-120, Olympus Imaging Corp., Japón) bajo un microscopio fotónico (Axiostar Plus, Carl Zeiss, Alemania). Análisis estadísticos A los porcentajes de germinación antes derealizar los análisis, se les aplicó una transformación angular o arcoseno (Sen–1Öx) de manera tal de homogenizar las varianzas [25]. La significancia estadística de las diferencias entre las medias de los pesos, % de germinación y cantidad de esporulación (conidias/mL) entre los diferentes ensayos, se calculó mediante las pruebas de análisis de Varianza (ANOVA) de una vía y de comparación múltiple...