Micriobilogia

1.- ¿Qué es un plásmido?
Un plásmido es una molécula de ADN circular o lineal de 1kb a 250kb y llega a contener de dos genes hasta treinta tiene la capacidad de replicarse independientemente del cromosoma; los genes que contiene un plásmido otorga ciertos privilegios a la célula huésped ya sea por reproducción sexual o por la extracción del mismo estando en el medio donde el huésped puedaaceptarlo
2.- ¿Que es  la electroforesis?
La electroforesis es el movimiento de partículas cargadas en un campo eléctrico. A diferencia de las proteínas, las cuales pueden tener una carga positiva o negativa, los ácidos nucleícos están cargados de forma negativa debido a su esqueleto de grupos fosfato. Por lo tanto, en una electroforesis, los ácidos nucleícos migrarán hacia el polo positivo, esdecir, el ánodo.
la agarosa puede ser utilizada como soporte para la corrida electroforética. La agarosa es un polisacárido extraído de algas marinas que tiene la propiedad de mantenerse en estado sólido a temperatura ambiente pero que a altas temperaturas se torna líquida. Esta característica permite una fácil preparación de una matriz porosa para ser usada en electroforesis.
La concentración deagarosa típicamente utilizada para electroforesis está entre el 0.5 % y el 2%. La concentración a usar se escoge según el tamaño del ácido nucleído a analizar. Esto porque la concentración de agarosa define el tamaño de los poros de la matriz, a mayor concentración, menor el tamaño de los poros y viceversa. Durante la electroforesis, los ácidos nucleídos lineales con un alto peso molecularmigrarán al ánodo más lentamente que ácidos nucleícos lineales con un menor peso molecular. La razón de esto es que los ácidos nucleídos de alto peso tardan más tiempo en atravesar los poros de agarosa. En el caso de ácidos nucleídos no lineales, como plásmidos circulares, la migración no solo dependerá del peso molecular sino también de otros aspectos como el grado de superenrrollamiento que éste posea.Generalmente en una preparación de plásmido se pueden observar distintas conformaciones de la misma molécula, la forma superenrrollada, la forma semi relajada y una relajada.
Algunos de los usos de la electroforesis de ácidos nucleícos en geles de agarosa son: determinar los tamaños moleculares de los ácidos nucleícos, analizar los fragmentos cortados con enzimas de restricción, comparar lostamaños entre sí de distintos tipos de ADN y aislamiento y recuperación de fragmentos de ADN purificados.

Una electroforesis típica consiste de los siguientes pasos, que fue lo que se realizó en el laboratorio:
1. Preparar un gel de agarosa a la concentración requerida
2. Mezclar las muestras a analizar con un amortiguador adecuado y un colorante (azul de bromofenol) el cual indica el frente decorrida de la electroforesis
3. Montar las muestras en el gel
4. Realizar la corrida electroforética
5. Visualizar los ácidos nucleícos.
Para la visualización de los ácidos nucleícos se utiliza un colorante fluorescente, el bromuro de etidio. Este colorante tiene la propiedad de intercalarse entre las bases nitrogenadas del ADN y el ARN. Debido a esta propiedad es un agente mutagénico y debemanipularse con cuidado. El bromuro de etidio generalmente se incorpora a la agarosa antes de “chorrear” el gel, o puede incorporarse luego de la corrida electroforética.
3.- Aplicaciones del uso de los plásmidos:
Los plásmidos son utilizados en las aéreas de ingeniería bioquímica e ingeniería genética así como biología molecular teniendo usos como la producción de proteínas como son; laproducción de insulina incluso de antibióticos por medio de el crecimiento de la bacteria con el plásmido que contenga el gen de interés que tendrá resistencia y así producir la proteína deseada; otro uso de los plásmidos con lo antes mencionado es la generación de genes.

4.- Describir el resultado de la electroforesis de sus plásmidos
En la siguiente imagen (equipo 4) se muestra la escalera en...