Micro Biorreactores

Tinción de Gram y Pruebas de sensibilidad a un antibiótico

Christian Xatruch García, Sofía Dinora Ramos Sibaja.

Laboratorio de Microbiología, Escuela de Farmacia, Facultad de Ciencias de laSalud, Universidad Internacional de las Américas, San José, Costa Rica.

Introducción

Objetivos

Desarrollo del Laboratorio
1. La primera parte de la práctica consistió en realizar una tinciónde gran sobre una muestra de algún microorganismo, esto para identificar a través de esa y al final del procedimiento, si corresponde a un organismo gram negativo o un gram positivo.

Se realizó laprueba con muestra de heces fecales expuestas en la clase anterior y en medio de cultivo NUTA. Primero de colocó sobre una lámina de trabajo una pequeña muestra de una colonia de este organismo, sele colocó durante 1 minuto Cristal Violeta, se lavó con agua y se le colocó lugol durante otro minuto, se volvió a lavar con agua y se le colocó alcohol concentrado de 20 a 25 segundos, por último selavó con agua y se colocó safranina durante 1 minuto más. Al finalizar el procedimiento se pudo observar que la muestra se torna color morado-violeta, por lo tanto corresponde a una bacteria grampositiva.

Se dejó secar la lámina por unos minutos y luego fue observada a través del microscopio.

Figura. Tinción Gram de la muestra de heces fecales.

2. A partir de las mismas muestras deheces fecales se realizó la prueba de sensibilidad a ciertos antibióticos, esto para determinar su resistencia o susceptibilidad antes estos microorganismos. Se colocó en Agar MUELLER HINTON. Dentro deeste medio de cultivo se inoculó la muestra a través de estriaciones que lo cubrieran todo, esto para colocar minutos después discos que corresponden a los antibióticos que se iban a poner a actuarcon los microorganismos.

Figura 1. Distribución uniforme de los discos antivirales, luego de una estriación completa del medio

Se colocó 5 discos de antibióticos sobre...