Micro satelites y bibliotecas genómicas

CONSTRUCCIÓN DE UNA LIBRERÍA GENÓMICA DE DNA CON UN PEQUEÑO INSERTO, MEJORADA POR SECUENCIAS MICROSATELITALES REPETIDAS

Para la construcción de mapas genéticos se ha utilizado polimorfismos de lassecuencias de DNA como marcadores co dominantes para incrementar la viabilidad del análisis genético de organismos con genomas grandes y complejos.
El aislamiento de genes es necesario para poderdeterminar una posición en un mapa genético o para localizar genes responsables de ciertas enfermedades humanas o algún otro fenotipo complejo.
De todas maneras la genética de los mamíferos y lahumana se ha visto limitada por la disponibilidad de información que puede aportar un marcador genético.

Para producir un mapa de marcadores de alta densidad para un genoma entero o para un únicocromosoma se necesita del aislamiento y caracterización de cientos de marcadores como repeticiones microsatelitales; generalmente se han utilizado dos métodos, el primero es escanear una inserción grande dela librería genómica con una terminación de oligonucleótidos (CA) o (TG). Los clones que son hibridados para investigar son purificados y divididos en subclones, los cuales son escaneados porhibridación de un solo fragmento que contenga la repetición. El fragmento luego es secuenciado y un STS es creado mediante la selección únicamente de cebadores que producen por PCR un fragmento de interés deun tamaño adecuado. El inconveniente de éste método son los requisitos para la hibridación y la secuenciación de subclones que son relativamente largos. Por lo tanto la alternativa más adecuado, lasegunda, sería construir y escanear una biblioteca a partir de pequeñas inserciones de 200 a 5000 pares de bases construidas en un vector plásmido.
En este artículo se pretendía hacer una bibliotecacon microsatélites. Primero se necesito hacer una biblioteca primaria que fue construida a partir de DNA canino purificado del bazo de un perro utilizando protocolos comunes. El DNA genómico fue...