Micro

Guía Nº 1
ESTERILIZACIÓN Y DESINFECCIÓN

Objetivos:

- Comprender los conceptos de esterilización y desinfección
- Conocer los distintos métodos de esterilización
- Comprender el efecto de los distintos métodos de esterilización sobre los microorganismos
- Aplicar correctamente los distintos métodos de esterilización en el material utilizado en microbiología
-Conocer y comprender los métodos de desinfección
- Comprender el concepto de asepsia y su importancia en microbiología

1. Conceptos básicos:

- Asepsia: ausencia de microorganismos

- Antisepsia: prevención de una infección o sepsis a través de la aplicación de un antiséptico

- Antiséptico: agente químico que no daña los tejidos vivos y destruye o inhibe el crecimiento delos microorganismos.

- Esterilización: proceso por el que todas las células vivas, esporas, virus y viroides son eliminados o destruidos.

- Desinfección: destrucción, inhibición o eliminación de microorganismos en estado vegetativo

- Desinfectante: agente químico utilizado para desinfectar objetos o superficies inanimadas.

- Saneamiento: reducción de una poblaciónmicrobiana hasta niveles que se consideran seguros, según normas de salud pública

2. Métodos de Esterilización:

Para trabajar asépticamente en un laboratorio de microbiología, no sólo se requiere esterilizar los medios de cultivo, sino que todo el material que tome contacto con los medios, muestras a analizar, asas, pipetas, pinzas, etc

Existen diversos métodos de esterilización, laelección de cuál utilizar, depende del material que se va a esterilizar.

a) Esterilización por agentes físicos: calor (temperatura) , filtración, radiación

➢ CALOR

❖ Calor Húmedo:

• Autoclavado: se realiza en una cámara cerrada herméticamente y que contiene agua, este equipo se llama autoclave y permite esterilizar bajo condiciones de temperatura y presión controladas.El equipo cuenta con un manómetro que registra la presion al interior del autoclave, una válvula de seguridad, una llave de purga que permita la salida del vapor, un termómetro y un reloj que permita seleccionar el tiempo de esterilización, en autoclaves automaticas controla el final del ciclo de esterilización y el apagado del equipo.
Para que se logre la esterilización del material,debe existir una relacion temperatura presion, que se cumple cuando el vapor en el interior del autoclave es saturado, es decir que no exista aire en el interior del equipo., si esta condicion no se cumple, la presion parcial del vapor de agua sera mas baja que la que indica el manómetro y por lo tanto la temperatura tambien sera menor.
Generalmente, se autoclava a 1 atmosfera de presion y121° C durante 15 – 20 minutos, dependiendo de la composicion quimica de los medios de cultivo o soluciones a esterilizar. Bajo estas condiciones mueren tanto las celulas vegetativas como las esporas, como consecuencia de la denaturalizacion de las macromeleculas y coagulación del citoplasma..

El autoclave es indispensable en microbiologia, ya que permite esterilizar medios de cultivo ysoluciones, siempre que no contengan sustancias termolabiles, en cuyo caso se deben utilizar otras técnicas. Ademas se utiliza para la esterilización de material de desecho , con residuos o ya utilizados ( placas, tubos, pipetas, jeringas, etc) y el material de vidrio que se requiere recuperar o reutilizar.

• Tindalizacion: este método es poco utilizado en microbiología para esterilizarlíquidos o sustancias que no resisten el tratamiento a través del autoclave debido al riesgo de alteración (caramelización de azúcares, denaturalización de antibióticos). Consiste en calentar el medio a una temperatura de 60-70°C durante 30 minutos ó 1 hora por tres veces consecutivas pero dejando un intervalo de 24 horas entre cada vez. A las temperaturas antes mencionadas todas las formas...