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Páginas: 8 (1950 palabras) Publicado: 15 de marzo de 2014

PRÁCTICA Nº 10

TRITURADO Y HOMOGENEIZADO DE UN ALIMENTO. PROCEDIMIENTO GENERAL

PREPARAR AGUA DE PEPTONA
Día: 22.01.2014

OBETIVO:

El triturado y homogeneización de un alimento es el primer paso para averiguar la calidad microbiológica del mismo.

PROCEDIMIENTO:

Hemos ido al almacén a por el bote de peptona, y pone que para 1000 ml se necesitan 16,1 gr. de peptona, comoqueremos diluirlo en 50 ml necesitamos pesar 0,8 gr. de peptona.
Con un vaso de precipitados pesamos en la balanza los 0,8 gr y a continuación con la ayuda de una probeta la llenamos de agua hasta los 50 ml, lo echamos en el vaso de precipitados donde tenemos la pesada y lo disolvemos todo bien.
Tenemos preparados 5 tubos, con sus tapones y todos ellos identificados, en una gradilla, a continuacióncon la ayuda de una pipeta de 10 ml y un pipeteador, echamos 9 ml de agua de peptona en cada tubo, para a continuación meterlos en el autoclave.

Ahora tenemos que preparar en una frasco de vidrio 225 ml de agua de peptona, para ellos procedemos de la misma manera a la hora de calcular cuánto tenemos que pesar de peptona, en este caso tenemos que pesar 3,62 gr: con el frasco de vidrio pesamos enla balanza los 3,62gr y a continuación con la ayuda de una probeta la llenamos de agua hasta los 225 ml, lo echamos en el frasco de vidrio donde tenemos la pesada y lo disolvemos todo bien.
Este frasco de vidrio irá a la nevera y después al autoclave, no enroscamos del todo el tapón (para que no se produzca presión dentro) y cubrimos este con papel de plata. A este frasco de vidrio le colocamosun papel indicador y lo identificamos.

Día: 24.01.2014

PROCEDIMIENTO (sigue):

Tenemos para triturar y homogeneizar pan.
Hemos pesado 25 gr. de pan, lo hemos cortado y troceado con la ayuda de un bisturí en condiciones estériles. Con los 225 ml de agua de peptona que habíamos preparado en la práctica anterior, se mezclan con los trozos de pan y los trituramos en el stomacher. Esta primeradilución es la de 1/10 (solución madre).

DILUCIONES:

Mediante este procedimiento obtenemos las diluciones 1/10², 1/10³, 1/10, 1/10,…
El denominador de estas fracciones se le llama FACTOR DE DILUCIÓN.
Con una pipeta estéril se toma 1 ml de la solución madre, y se pasa a un tubo con 9 ml de agua de peptona (anteriormente preparados). Se deposita la pipeta en un vaso de precipitados dondehay un poco de desinfectante. Agitar luego el tubo en el Vortex. Este tubo se identifica: 1/10².

Con una nueva pipeta estéril se toma 1 ml de la dilución 1/10² a un nuevo tubo con 9 ml de agua de peptona. Se deposita la pipeta en un vaso de precipitados donde hay un poco de desinfectante. Agitar luego el tubo en el Vortex. Este tubo se identifica: 1/10³.

Repetir el mismo proceso 3 veces más,siempre tomando un ml de la disolución anterior.

PRÁCTICA Nº 11
Día: 31.01.2014

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE AGUAS. DETERMINACIÓN DE AEROBIOS TOTALES

OBETIVO:

Cantidad de bacterias heterótrofas, aerobias y anaerobias facultativas mesófilas, capaces de crecer en un medio de agar nutritivo, mediante el recuento del número de colonias desarrolladas en una placa de medio de cultivo sólido,al cual se le ha sembrado un volumen conocido de agua, transcurrido un tiempo y a una determinada temperatura (a 37ºC bacterias de origen fecal, a 22ºC flora autóctona).

PROCEDIMIENTO:

MUESTRA PROBLEMA: agua de un estanque.

Sacamos del autoclave el frasco de vidrio que contiene PCA, y lo enfriamos en el baño térmico. También sacamos las pipetas y los tubos A y B que contienen 9 ml de aguade peptona.

Identificamos 6 placas:
-Arriba de la placa: el medio de cultivo (PCA).
-A la izquierda: la fecha.
-A la derecha: Nombre de la pareja de trabajo.
-Abajo: la dilución que es. En este caso va a ver 2 placas con dilución 0, otras 2 placas con dilución -1 y otras dos placas con dilución -2.




De la muestra problema se toman 3 ml con una pipeta y se echa 1 ml en el tubo A...
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