Micro

MICROBIOLOGÍA

BLOQUE I: GENERALIDADES Y TÉCNICAS MICROBIOLÓGICAS

TEMA 3: CULTIVO DE MICROORGANISMOS


EXIGENCIAS NUTRITIVAS: todos los sistemas biológicos tienen en común que necesitan unos requerimientos nutricionales:
1) Fuente de energía: pueden utilizar como fuente de energía para obtener ATP:
- Luz: organismos fototrofos.
- Oxidaciones químicas: organismosquimiotrofos (si son orgánicos organotrofos y si son inorgánicos son litótrofos).


2) Fuente de carbono: - Carbono inorgánico (CO2): organismos autótrofos.
- Carbono orgánico: organismos heterótrofos.


3) Fuente de nitrógeno: Nitrógeno atmosférico, sales (nitratos) o sales amoniacales, aminoácidos, proteínas…


4) Fuente de sales inorgánicas: P, Ca, Mg, S, Zn… Las Bacteriashalófilas sólo viven en ambientes con altas concentraciones salinas.


5) Fuentes de vitaminas: necesarias para algunas bacterias, pero no todas. Algunas las producen. Lactobacillus necesita B6 y B12 y Escherichia coli produce la vitamina K.


6) Agua: siempre tiene que haber una cierta concentración de agua disponible, para transportar nutrientes al interior.

Nosotros somos organismosquimioorganoheterótrofos.


Factor limitante: determina el crecimiento microbiano. Si se le administra este factor limitante en pequeñas dosis, el microorganismo crecerá de manera proporcional a la cantidad administrada. Lactobacillus se utiliza en valoraciones alimenticias de vitaminas. Necesita vitamina B6. Con una gráfica patrón, podemos determinar la concentración de vitaminas en unalimento en función del crecimiento de la problación.


LOS MEDIOS DE CULTIVO se clasifican por:
- Composición química:
Cultivos sintéticos o definidos: composición química conocida y definidos todos sus componentes cuantitativamente.
Cultivos complejos o naturales: cuantitativamente se desconoce su composición, pero sí se sabe cualitativamente.
- Estado físico:
Líquidos: exceso deagua, difusión libre de microorganismos
Sólidos: para aislar cultivos. Añado agar.
Semisólidos: añadiendo 2% de agar
- Disposición:
Matraz o tubo para medios líquidos
Placa o tubo inclinado para medios sólidos.
-Función:
Enriquecidos: medio base (con todas las exigencias nutritivas) al que se adiciona otro compuesto que facilita el crecimiento de un microorganismo concreto perosin perjudicar a otros.
Selectivos: medio base al que se añade u omite alguna sustancia cuya adición o ausencia inhibe el crecimiento microbiano de unos tipos pero no de otros. Favorece el aislamiento.
Diferenciales: medio base que incorpora reactivos o sustancias que nos permiten distinguir tipos de microorganismos por sus propiedades fisiológicas. Por ejemplo, utilizando un indicador de PH:si es ácido el microorganismo es fermentativo.


MATERIAL DE CULTIVO
a) Asa de siembra: asa con una prolongación metálica que termina en un círculo.Para medios sólidos. Es buena porque por la tensión superficial nos permite coger gotas.
b) Asa de Drigalski: es importante para la siembra de medios líquidos. Consta de una varilla de vidrio con una especie de triángulo al final y permiteextender el contenido de una gota por toda la placa.
Los cultivos se llevan a cabo cerca de un mechero o llama: para esterilizar el material.


TIPOS DE SIEMBRA
1) Medio sólido: depende de cómo sea la muestra:
-Muestra líquida: con el asa de siembra se recoge la muestra en forma de gota y se siembra por extensión.
-Muestra sólida: con el asa de siembra se realiza una siembra porestría; se recorre toda la placa formando estrías, primero más juntas y cada vez más separadas.
-Muestra semisólida: con el asa de cultivo modificada siembro en picadura (pica el medio semisólido).


2) Vertido en placa: se prepara el medio y se añade la muestra antes de poner el medio en la placa, y así el microorganismo crece en la superficie y en las capas internas.

CULTIVO PURO...