Micro

MICROBIOLOGIA: CLASE 2
Procariontes (microbios) son sistemas pequeños
Yema de huevo se ve a ojo desnudo
En el límite del ojo desnudo y la microscopia de luz encontramos el huevo de pescado (apenas se ve)
En microscopio electrónico se ve objetos de 100 micrómetros de diámetro. Aquí se ven los detalles tales como un organelo subcelular
Bacterias se ven por microscopio de luz
E. coli está en ellímite del microscopio de luz y el electrónico
El microscopio electrónico se utiliza para ver cosas muy precisas
La microscopia óptica es “portátil”
Microscopia de campo claro, campo oscuro y fluorescencia.
La microscopia óptica posee un aumento de 1200 veces como máximo según lo que se quiera observar
La microscopia electrónica es una técnica muy primitiva. Es un aparato que se instala en una salacompleta. Tiene un aumento por sobre 1.000.00 de veces. Por este microscopio es posible ver el E.R, superficies virales, pared celular, etc.
Microscopia electrónica se divide en 2 grandes ramas: el microscopio en 2D o de transmisión y la microscopia en 3D o de barrido. En este último se analizan especímenes en 3 dimensiones dando un relieve de la superficie que se está observando
La microscopía decampo claro es en 2 dimensiones, se ven por lo general limites, formas muy gruesas. En este campo NO se tiñe, se visualiza la luz pasar a través del “espécimen”
En microscopia de campo oscuro se toman faces de contraste y se ilumina solamente el objeto que se quiere visualizar.
En la microscopia de fluorescencia se introdujo una molécula fluorescente de manera que bacterias o células se haganfluorescentes y se marquen con una “sonda”. Estas moléculas fluorescentes se ponen en el medio de tal manera que puedan ingresar al metabolismo de la célula y marcan. Algunas pueden marcar el material genético, otras los ribosomas, etc. Se marcan para ser visualizadas mejor, con más claridad. Forma parte de la MICROSCOPIA OPTICA
La microscopia electrónica tiene un alto nivel de aumento, sevisualizan detalles, obtener excelente resolución (de acuerdo a lo que se vea)
Partículas virales se ven por microscopio electrónico
En microscopia de barrido se pueden ver superficies, relieve. Se utiliza material computacional para visualizar
Hay que teñir bacterias. Se toma jeringa y se deposita bacteria sobre un portaobjeto (……………………………………..). Una vez que muestra ya se secó y las bacterias seadhirieron a la superficie, se lleva portaobjeto al microscopio óptico. Este es el protocolo para una tinción simple. La visualización puede ser en campo claro con o sin tinción
La tinción de Gram fue descubierta por el científico Hans Christian Gram. Es una TINCION DIFERENCIAL, ya que permite diferencial esencialmente cualquier tipo de bacterias: entre una bacteria Gram(+) y una Gram(-). Las Gram(-) NO setiñen, en cambio las Gram(+), sí
Las bacterias Gram(+) posterior a la tinción, se verán de color VIOLETA y las Gram(-) se tiñen de color ROSA
La tinción está basada en el uso del cristal violeta, nos permite clasificar a cualquier bacteria en una Gram(+) Ó una Gram(-). Es un análisis DICOTOMICO
La tinción de Gram nos sirve para saber la morfología que tiene (bacilos, cocos, espiral)
La tincióndiferencial es el primer paso para el análisis dicotómico. Este protocolo se aplica para cualquier tinción
Se debe depositar la muestra en un portaobjeto y dejar que se seque. Se agrega la tinción de cristal violeta sobre las bacterias que ya están secas y adheridas al portaobjeto. En 1 minuto se retira el exceso de bacterias que están pegadas y se verá como todas las bacterias se tiñen. Posteriora la tinción con cristal violeta van a quedar violeta. Se sigue procesado y se agrega una solución de yodo y se esperara 3 minutos. No se notan diferencias con respecto a la primera tinción. La diferencia surge cuando agregamos un reactivo a base de contraste. Este reactivo DECOLORIZA a las bacterias GRAM(-), permaneciendo coloreadas las bacterias Gram(+). Luego, se agrega una solución...