Microanalisis

INFORMACION PRUEBAS DE ORIENTACION
Hematología Forense
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* O-TOLUIDINA
* La o-toluidina es una amina aromática primaria que en ácido acético reacciona con las peroxidasas que posee el grupo hemo de la hemoglobina (Hb)
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Cómo Actúa
* La peroxidasa descompone el aguaoxigenada, produciendo agua y oxígeno.
* Es este oxígeno el que actúa sobre el reactivo orgánico reducido (o-toluidina), transformándolo en su forma oxidada, de color característico (verde-azulado).
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* Interferentes
* Peroxidasas de algunos vegetales.
* Agentes fuertemente oxidantes.
* Algunos metales y sales metálicas.
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* Asísoy

Reacción química

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REACTIVOS
REACTIVO A
* 0,1 g reactivo de o-toluidina
* 3 mL de ácido acético glacial
* 4 mL de etanol
* agua destilada
* REACTIVO B
* Peróxido de hidrógeno (H2O2) AL 30%
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PREPARACIÓN DE REACTIVO
* El reactivo se prepara a partir de 0,1 g de o- toluidina y 4 mL deetanol. Se añade 3 mL de ácido acético glacial y 3 mL de agua destilada. Esta solución se puede guardar en la nevera.
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* Continúa
* El peróxido de hidrógeno debe tener una concentración 30% v/v, en caso de no tener esta concentración es necesario preparar una solución de esta sustancia a la concentración indicada. (mezclar 30 mL de peróxido dehidrógeno en 100 mL de solución). Recordando que el solvente universal es el agua (H2O destilada).
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* KM
* La prueba de orientación de Kastle Meyer se basa en una reacción de óxido-reducción, donde el reactivo Kastle Meyer trabaja con las enzimas en un medio básico como el hidróxido de potasio (KOH), en presencia del indicador fenolftaleína dando un colorfucsia.
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Esquema de la reacción

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REACTIVOS
REACTIVO A
* 0,1 g reactivo de fenolftaleína
* 1 g de hidróxido de potasio (KOH)
* 1 g de polvo de zinc
* 1 mL de alcohol absoluto
* granallas de zinc
* agua destilada
REACTIVO B
* Peróxido de hidrógeno (H2O2) al 30%
……………………………………………………………………..PREPARACION
* En un vaso de precipitado se disuelven 1 g de KOH en 5 mL de agua destilada. Se agrega 0,1 g de fenolftaleína y de 1g de polvo de zinc, se refluja y se calienta a ebullición hasta la decoloración de la misma. Se deja enfriar, se decanta y se añade 1 mL de alcohol absoluto. Guardar el reactivo con granallas de zinc para conservar el ambienta reductor.………………………………………………………………………..
Conoce el Peróxido (H2O2):
Es un compuesto químico con características de un líquido altamente polar, fuertemente enlazado con el hidrógeno tal como el agua, que por lo general se presenta como un líquido viscoso; es conocido por ser un poderoso oxidante.
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* Más acerca del peróxido
También se conoce como agua oxigenada, es un líquido incoloro a temperatura ambiente con sabor amargo, pequeñas cantidadesdel peróxido son inestable y se descompone rápidamente en agua y oxígeno con liberación de calor.
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* Fenolftaleína
* Propiedades: es un polvo cristalino amarillo pálido, forma soluciones casi incoloras en medio neutro o ácido y soluciones púrpura carmín brillante en presencia de álcali o base, pero incoloras en presencia de gran cantidad de alcali;soluble en alcohol, éter y álcalis, insoluble en agua.
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Luminol
* Es un derivado del ácido ftálico y es sólido verdoso. Su mayor importancia reside en la reacción de quimioluminiscencia que da con peróxidos en presencia de hierro como catalizador.
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Quimioluminiscencia
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