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Facultad de Medicina veterinaria y Recursos Naturales Escuela de Medicina Veterinaria Departamento de Microbiología Laboratorio de Microbiología

LABORATORIO N°8: “FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE”INTRODUCCIÓN La familia enterobacteriaceae, agrupa principalmente a los organismos considerados como coliformes, entre otros. Los organismos agrupados como coliformes corresponden a los generosEscherichia, Klebsiella y Enterobacter , como representantes principales. Estos posen una alta importancia en la Medicina Veterinaria, principalmente asociada a la industria alimentaria, donde son elreflejo de contaminación fecal en los alimentos. Este último punto se asocia a un mal manejo por los manipuladores de alimentos, ya que E.coli, por ejemplo, se encuentra en el intestino de animales.MATERIALES Y METODOS Tubo de ensayo Placa de Petri Mechero bunsen Asa Estufa de cultivo Cepa bacteriana : Escherichia coli Klebsiella

Medios de cultivo: XLD MCK Levine Urea Agua peptonada Medio MRVPAgar citrato Agua peptonada Reactivo de kovacs Rojo Metilo

1. En los medios Levine, McK y XLD dividir la placa en dos y aplicar un abundante inoculo de E.coli y Klebsiella en estría procurandomantener separados los cultivos en la placa, cultivar en estufa por 24 horas a 37° 2. Prueba IMViC: 2.1 Producción de Indol: Se inoculan por agitación dos tubos de agua peptonada con E.coli y Klebsiella,llevar a la estufa por 24 horas a 37°C, luego del tiempo de cultivo se aplica el reactivo de Kovacs y se observa si hay o no formación de indol de manera indirecta a través de la formación de unanillo rojo si es positivo. 2.2 Reacción Rojo de Metilo: En el medio Voges Proskauer (MRVP) se inoculan las dos cepas bacterianas antes mencionadas, por agitación, se lleva a la estufa por 3-5 días a 37°C,luego se toman 5 mL del cultivo al cual se le agrega 2 a 3 gotas de rojo metilo. 2.3 Reacción de Voges Proskauer: Utilizando el mismo cultivo MRVP, se toma 1mL de este , luego se le agrega 0,5 mL...