Microbiología

La reacción CAMP es un sinérgico lisis de los eritrocitos por la interacción de una proteína extracelular (factor CAMP ) producida por algunas especies de estreptococos con el Staphylococcus aureussphingomyelinase C ( beta - toxina ) . Estreptococos del grupo A ( Streptococcus pyogenes GAS [ ] ) han sido considerado durante mucho tiempo CAMP negativa , y esta reacción se ha usado comúnmente paradistinguir GAS de Streptococcus agalactiae . Nosotros aquí proporcionan la prueba de que el gas posee este gen y producir un factor CAMP extracelular capaz de participar en una reacción CAMP positiva . El factor CAMP S. pyogenes se especifica mediante un marco de lectura abierto 774 pb homólogas a los genes del factor CAMP de S. agalactiae andStreptococcus uberis . Este gen , designatedcfa , seaisló en un fragmento de 1256 pares de bases y inEscherichia coli clonados . Los clones recombinantes de E. coliexpressing cfa secretan un factor CAMP activo . La proteína de 28,5 kDa deducida codificada por CFA se compone de 257 aminoácidos , con un péptido señal de 28 - amino - ácido predicho . Gen Thecfa está muy extendido entre GAS : 82 de 100 GAS aislamientos clínicos produjo una reacción CAMPpositiva. De las cepas de CAMP - negativas , 17 de las 18 cepas de GAS contenía el gen cfa . Además , se detectó actividad de cAMP en los estreptococos de los serogrupos C , M , P, R , y U. El gen cfa se clonó y se expresó activamente en Escherichia coli y fusiones de genes fueron hechas , colocando el gen de la β - galactosidasa ( lacZ ) bajo el control de el promotor cfa . Estas fusionescfapromoter - lacZ se introdujeron en S. pyogenes a través de un vector de integración específica de sitio del bacteriófago derivada de donde se mostró que el gen cfa tiene un fuerte promotor que puede estar sujeta a factores reguladores , que aún no identificados . Los resultados que aquí se presentan , junto con los informes anteriores , indican que el gen del factor CAMP es bastante extendida entrelos estreptococos , estando presente al menos en los grupos A , B , C, G , H, P, R , y U.
él reacción CAMP , como se describe originalmente por Christie et al . ( 3 ) , es la lisis de eritrocitos de oveja sinérgico por Staphylococcus aureussphingomyelinase C ( beta - toxina ) y el factor CAMP ( cohemolysin ) , una proteína secretada 25,3 kDa a partir de estreptococos del grupo B ( GBS [Streptococcus agalactiae ] ) ( 26 ) . La reacción CAMP consta de dos pasos secuenciales y se lleva a cabo con eritrocitos cuyas membranas celulares contienen al menos 45 % en moles de esfingomielina ( 35 , 41 ) . El primer paso es la hidrólisis de esfingomielina de la membrana y los fosfolípidos por la acción de una esfingomielinasa o fosfolipasa ( 5 ) . En el segundo paso , el factor CAMP no enzimáticamenteinteractúa con la membrana resultante metaestable , comúnmente mediante la unión de la ceramida publicado anteriormente , que conduce a la lisis celular ( 2 , 5 ) . Además de su papel en cohemolysis , la proteína CAMP se une en una reacción no inmunitaria con la parte Fc de inmunoglobulinas G y M , dejando el sitios Fab activo ( 17 ) . Aunque el papel del factor CAMP en la patogénesis no estáclara , varias investigaciones sugieren que la liberación de esta proteína durante las infecciones sistémicas podría alterar la respuesta inmune del huésped . Por ejemplo , los conejos que recibieron una sola inyección intravenosa de proteína parcialmente purificada CAMP de GBS murieron rápidamente . En los ratones , la dosis de la misma proteína tenía que ser 45 veces mayor en relación con la masacorporal en la matanza ( 32 ) . Sin embargo , los ratones que habían recibido inyecciones previas del factor CAMP altamente purificada a partir de GBS desarrollan septicemia fatal cuando se infectan por vía intraperitoneal con dosis subletales de GBS ( 17 ) . Estas observaciones proporcionan apoyo para una función de la proteína CAMP como un factor de patogenicidad .

Los genes del factor CAMP...