Microbiología

Técnicas de Coloración o Tinción

Son técnicas empleadas en microbiolobia para la visualización de las bacterias mediante colorantes especiales.
Se emplea para
Aumentar la visibilidad de losmicroorganismos
Distinguir tipos diferentes de celulas
Acentuar sus características morfológicas
Presencia de determinados constituyentes celulares
Conservarlos para su estudio posterior
Paraobservación de microorganismos dentro de células

Preparación de la muestra a teñir
Frotis o extendido
Es una película de bacterias extendidas sobre un portaobjeto y secadas al aire
Método: se colocauna gota de agua sobre la lámina
Se toma una pequeña cantidad de muestra (colonia) con el asa bacteriológico y se diluye en la gota de agua
Dejar secar
Fijación
Es el proceso por el cual seconservan y se fijan en su posición las estructuras internas y externas del microorganismo.
La fijación debe lograr que las células teñidas y observadas al microscopio se parezcan lo más posible a lascélulas vivas
Efecto de la fijación:
Inactiva enzimas que puedan alterar la morfología celular y endurece las estructuras celulares de manera que no cambien durante la tinción y observación destruye almicroorganismo y lo fija firmemente al portaobjeto
Métodos de fijación
Existen dos clases de fijación fundamentalmente diferentes
Calor: Consiste en calentar suavemente el frotis bacteriano a lallama. Este método conserva adecuadamente la morfología general pero no las estructuras internas de las células.
Fijación química: Consiste en fijar el frotis con fijadores químicos.
Este métodoprotege las estructuras finas y la morfología de microorganismos delicados, penetran las células y reaccionan con compuestos celulares como proteínas, lípidos para inactivarlos y convertirlos eninsolubles e inmóviles.
Los fijadores químicos empleados son metanol, ácido acético, formaldehídos, glutaraldehídos.
Método: Cubrir el frotis con el fijador químico por un minuto.

Coloración o...