Microbiologia aplicada

MICROBIOLOGIA APLICADA Manual de Laboratorio

APENDICE “A”
COMPOSICION Y PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

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1. AGAR NUTRITIVO. Bacto Nutrient Agar (Difco) Fórmula: Ingredientes por litro. Extracto de carne............................3 Peptona...........................................5Agar...............................................15 pH final: 6.8 ± 0.2 a 25 °C. Método de preparación: 1) 2) 3) 4) Suspender 23 g en 1 litro de agua destilada o desmineralizada. Calentar a ebullición para disolver completamente. Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 15 libras de presión (121°C). Distribuir en la forma deseada. g g g

2. CALDO NUTRITIVO. Bacto Nutrient Broth (Difco) Fórmula: Ingredientes por litro. Extracto decarne............................3 Peptona...........................................5 pH final: 6.8 ± 0.2 a 25 °C. Método de preparación: 1) Disolver 8 g en 1 litro de agua destilada o desmineralizada. 2) Distribuir en tubos. 3) Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 15 libras de presión (121 °C). g g

3. CALDO ROJO DE FENOL CARBOHIDRATOS*. Bacto Phenol Red Carbohydrate* Broths (Difco) *Dextrosa,lactosa, maltosa o algún otro, para realizar pruebas de fermentación de carbohidratos.

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Fórmula: Ingredientes por litro. Caldo Base Rojo de Fenol: Peptona proteosa No. 3 Difco............. 10 g Extracto de carne.................................. 1 g Cloruro de sodio.................................... 5 g Rojo defenol.................................. 0.018 g Carbohidrato deseado........................... 5 g pH final: 7.4 ± 0.2 a 25 °C. Método de preparación: Base de Caldo Rojo de Fenol. Bacto Phenol Red Broth Base. (Difco). 1) Suspender 16 g de Bacto Base de Caldo Rojo de Fenol y 5 a 10 g (0.5 a 1.0%) del carbohidrato deseado en 1 litro de agua destilada o desmineralizada. 2) Agitar para disolver completamente. 3) Distribuir en tubosde ensayo que contengan campana Durham. 4) Esterilizar en autoclave a 110 °C durante 10 minutos o por filtración y en condiciones asépticas distribuir el medio en tubos estériles, con campana Durham. Si se prefiere, el medio basal puede ser preparado sin el carbohidrato y añadir posteriormente una solución del carbohidrato deseado esterilizada por filtración o en autoclave al medio basalpreviamente eterilizado y enfriado. (Difco) Caldos Rojo de Fenol Carbohidratos. Bacto Phenol Red Carbohydrate Broths. (Difco) 1) Suspender 21 g del caldo carbohidrato rojo de fenol apropiado en 1 litro de agua destilada o desmineralizada y agitar para disolver completamente. 2) Distribuir en tubos conteniendo campana Durham. 3) Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 15 libras de presión (121 °C). 4. AGARALMIDON. Bacto Starch Agar. Fórmula: Ingredientes por litro. Extracto de carne...........................3 g

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Almidón Soluble, Difco.................10 Agar..............................................12 pH final: 7.5 ± 0.2 a 25 °C. Método de preparación: 1) 2) 3) 4)

g g

Suspender 25 g en 1 litro de agua destilada o desmineralizada.Calentar a ebullición para disolver completamente. Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 15 libras de presión (121 °C). Distribuir en la forma deseada.

5. AGAR GELATINA. Bacto Nutrient Gelatin. Fórmula: Ingredientes por litro. Extracto de carne....................... 3 g Peptona...................................... 5 g Gelatina.................................. 120 g pH final: 6.8 ± 0.2 a25 °C. Método de preparación: 1) Disolver 8 g en 1 litro de agua destilada o desmineralizada. 2) Distribuir en tubos. 3) Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 15 libras de presión (121 °C).

6. CALDO NITRATO. Bacto Nitrate Broth (Difco) Fórmula: Ingredientes por litro. Extracto de carne......................... Peptona........................................ 3g 5g

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