Microbiologia del agua

IES

PG / MICRO / 003

Manuel Antonio

Hoja 1 de 4
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
Ed. 0

C.M.

Fecha:
26−01−2001

Laboratorio
1.− OBJETO:
El objeto del presente documento es la preparación de medios de cultivo.
2.− ALCANCE:

Este procedimiento podrá aplicarse para la preparación de medios de cultivo en placa o en tubo, recto o
inclinado, partiendo de preparados comercialesliofilizados.
3.− REFERENCIAS:
• F. CALVO, V. PUIG. Microbiología. Ed. Ecir − Valencia.
• E. LEAO DE MATTOS SOUNIS. Curso práctico de microbiología. Ed. McGraw−Hill.
4.− GENERAL:
La clasificación de los medios es:
• Según su consistencia
• Sólidos: que llevan una sustancia que se llama agar, que da consistencia sólida y va a ser el soporte de
los compuestos necesarios en la nutrición delas bacterias.
• Semisólidos: tienen menos agar, una proporción de 0.1% a 0.5%.
• Líquidos: se llaman caldos.
• Según su composición
• Medios sintéticos: que son medios de cultivo de composición conocida o definida, se utilizan muy
poco y suelen hacerse para cultivar una especie de bacterias determinada.
• Medios generales: tienen una composición en la que crecen la mayor parte de losmicroorganismos.
Aportan los componentes nutritivos más comunes para todas las bacterias. (PCA, TSA, APHA).
• Medios enriquecidos: son medios generales a los que se les añade sustancias que aumentan su poder
nutritivo y pueden crecer heterótrofos exigentes.
• Medios selectivos: se le adicionan al agar nutritivo, sustancias que inhiben el crecimiento de un grupo
de microorganismos, sin aceptar eldesarrollo de otras.
• Medios diferenciales: llevan reactivos que nos permiten diferenciar entre todos las bacterias crecidas
unas de otras.
• Medios de caracterización: se utilizan para identificar bacterias, dan lugar a una respuesta concreta al
metabolismo bacteriano.
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PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
Ed. 0
1

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Fecha:
26−01−2001Laboratorio
La composición de los medios y caldos:

Todos los medios llevan agua, peptonas (que son compuestos intermedios de hidrólisis de las proteínas),
extracto de carne (se prepara a partir de carne de vaca troceada y macerada, suministra componentes
nitrogenados, también no nitrogenados y alguna vitamina), extracto de levadura (se somete la levadura a una
extracción con agua y seevapora, luego a sequedad y tiene la misma función que el extracto de carne pero es
mucho más barata), gelatina (se prepara hidrolizando colágeno en agua hirviendo), agar (componente para dar
consistencia a los medios, se extrae de esta alga, la Gelidium corneum), cloruro sódico (para mantener la
presión osmótica), sustancias inorgánicas (Na, K, Ca...), sustancias orgánicas (como fuentes decarbono y
nitrógeno fundamentalmente e hidrógeno), productos fermentables (monosacáridos, disacáridos y tienen dos
funciones: producir energía y para la identificación y clasificación de los microorganismos).
5.−MATERIAL Y PRODUCTOS:
MATERIAL
Vaso de precipitados

Nº
1

Baño termostático

1

Agitador magnético

1

Placas petri

4

Autoclave

1

Frasco de vidrio pírex

1Nevera

1

Mechero Bunsen

1

Cabina de flujo laminar

PRODUCTOS

1

PCA
TSA
APHA
Agua

6.− PROCEDIMIENTO:
6.1.− Método operatorio:
• Se pesa la cantidad de medio especificada por el fabricante
• Se vierte el medio en un frasco pírex y se completa con el agua necesaria para completar el medio a
preparar
• Se pone a ebullición en un agitador con calefacción.
• Se pasa alautoclave, se esteriliza a 121ºC unos 20 min.
• Se deja enfriar hasta unos 55 − 60ºC.
• Se llenan las placas y/o tubos.
• Las placas se dejan gelificar (solidificar) tapadas sobre la mesa o en la campana y los tubos se dejan
gelificar inclinados.
• Se elimina el vaho (*) y se guarda en la nevera.

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