Microbiologia Manual

Microbiología general 2008 - 2009
Antonio G. Pisabarro Catedrático de Microbiología

Tema 2: Cultivo de microorganismos
• • • • • • • • • • • • • • • Crecimiento microbiano. Cultivo de microorganismos. Medios de cultivo. Métodos de aislamiento. Concepto de cultivo puro. Crecimiento microbiano en medio líquido. Crecimiento microbiano en medio sólido. Concepto de muerte de un microorganismo.Medida del crecimiento y enumeración de microorganismos. Crecimiento microbiano equilibrado. Cinética de crecimiento de un cultivo estanco. Factores físicos y químicos que influyen en el crecimiento. Rendimiento de los cultivos. Cinética de crecimiento en un cultivo continuo. Tipos de fermentadores.

Crecimiento microbiano
Ciclo celular Crecimiento

20-30 min E. coli a 37º

Medios decultivo
• Soporte para el crecimiento de microorganismos • Clasificación

– definidos y complejos – líquidos y sólidos – En función de los microorganismos que pueden crecer en ellos, los medios pueden ser:
• • • • • Generales Selectivos Diferenciales Selectivo-diferenciales Medios de enriquecimiento

Nutrición y cultivo de microorganismos
• Varios tipos de metabolismo
– Foto- / Quimio– - lito- / - organo –

• Concentración de nutrientes: oligotrofía • La mayoría de las especies microbianas no son cultivables

Cultivos puros y recuento de microorganismos
• Tiene sólo un tipo de microorganismo • En medio sólido forma una colonia aislada • Cada colonia procede de un único individuo inicial • El número de colonias nos indica el número de células iniciales

Medios de cultivo
•Soporte para el crecimiento de microorganismos • Clasificación
– definidos y complejos – líquidos y sólidos – En función de los microorganismos que pueden crecer en ellos, los medios pueden ser:
• • • • • Generales Selectivos Diferenciales Selectivo-diferenciales Medios de enriquecimiento

Esterilización de medios de cultivo
• Eliminación de todo tipo de microorganismo • Concepto deesterilidad y asepsia • Autoclaves

Programa de prácticas
Práctica 1: Preparación de medios de cultivo y siembra de bacterias en medios de cultivo. Esterilización. Práctica 2: Análisis microbiológico de la contaminación ambiental y de manipuladores.

Práctica 3: Obtención de cultivos puros. Práctica 4: Recuento del número de bacterias por mililitro de un cultivo líquido.
Práctica 5: Cultivo debacterias anaerobias. Práctica 6: Observación de bacterias teñidas. Tinción Simple y Tinción de Gram. Práctica 7: Transformación bacteriana por resistencia a ampicilina. Práctica 8: Antibiograma. Práctica 9: Efecto de las altas temperaturas sobre el crecimiento microbiano Práctica 10: Aislamiento y caracteristicas de un bacteriófago (virus de bacterias). Práctica 11: Observación de levaduras. Práctica12: Tinción de esporas. Práctica 13: Tinción de cápsula.

Cultivos puros y recuento de microorganismos
• Tiene sólo un tipo de microorganismo • En medio sólido forma una colonia aislada • Cada colonia procede de un único individuo inicial • El número de colonias nos indica el número de células iniciales

Medida del crecimiento
Número de células Masa celular Componentes celulares Paredcelular DNA RNA proteínas

Medida del crecimiento
Número de células

Medida del crecimiento

Biología de los Microorganismos de Brock

Medida del crecimiento

Biología de los Microorganismos de Brock

Medida del crecimiento
Masa celular

Cinética del crecimiento
Nº generaciones (g) 0 1 2 3 4 5 6 7 …. g Número de células N 1 2 4 8 16 32 64 128 …. 2g

N = N0 2g

Cinética delcrecimiento
N = N0
g 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

2g
N 1 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8192 16384 32768 65536

140000 120000 100000 80000 60000 40000 20000 0 0 5 10 15 20

6,00 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 0,00 0 5 10 15 20

Cinética del crecimiento
140000 120000

N = N0 2g Log N = Log N0 + g Log 2
N puede ser Biomasa Densidad óptica Número de células Conc...