Microbiologia

Objetivos

- Realizar los procedimientos adecuados para hacer medio de cultivo (agar lactosado).
- Dar a conocer los materiales, reactivos y equipo para preparar un medio de cultivo.

INTRODUCCION

En microbiología, un cultivo es un método para la multiplicación de microorganismos, tales como bacterias , hongos y parásitos, en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el procesodeseado. Un cultivo es empleado como un método fundamental para el estudio de las bacterias y otros microorganismos que causan enfermedades en medicina humana y veterinaria.
Los diferentes medios y técnicas de cultivo son esenciales en un laboratorio de microbiología en la medicina, pues sirven para identificar las bacterias causantes de las enfermedades infecciosas y los antibióticos a los que sonsensibles esas bacterias. Los cultivos suelen usarse en medicina para determinar la presencia de agentes patógenos en fluidos corporales (como por ejemplo la sangre o la orina).
Encontramos que los medios de cultivos se clasifican de acuerdo a:
Según su estado físico:
• Medios líquidos
• Medios sólidos
• Semi sólidos
Según su utilidad practica:
• Medios corrientes
• Medios mejorados
•Medios especiales
• Medios selectivos
• Medios indicadores o diferenciales
Según su origen.
• Origen animal
• Origen vegetal
• Sintéticos
En esta ocasión se realizara el según su medio sólido: este se utiliza para obtener bacterias aisladas por la formación de colonias sobre la superficie del medio de cultivo y para el estudio de la morfología de las colonias, lo que no permiten los medioslíquidos.


MATERIALES

• matraz 200 ml
• mechero
• trípode
• rejilla
• vaso pp.
• varilla de vidrio
• indicador ph
• papel Craft
• algodón
• espátula

REACTIVOS
• lactosa
• nutriente agar
EQUIPO
• Auto clave
• balanza

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Preparación del medio de cultivo
• En esta ocasión se preparara el agar lactosado el cual es preparado con xg de agar nutritivoy xg de lactosa
• Se deben pesar cada uno de los componentes.
• El medio de cultivo se debe pesar en una balanza con una sensibilidad de 0.1g, utilizando espátulas o cucharas de material plástico o acero inoxidable, que estén limpios y secos.
• Colocar la cantidad pesada en un matraz Erlenmeyer o vaso precipitado de vidrio neutro, limpio y seco.
• Añadir la cantidad necesaria de aguadestilada y disolver con una bagueta de vidrio.
• Si se va a preparar un medio sólido, se debe tener la precaución que el agar se disuelva completamente. El agar esta completamente disuelto cuando no se visualizan grumos en las paredes del matraz
• Evitar calentar innecesariamente los medios de cultivo.
• Agregar indicador ph:
 Colorantes e indicadores se utilizan en los medios selectivos ydiferenciales. Los colorantes actúan como agentes bacteriostáticos o como inhibidores del crecimiento. Se utilizan principalmente: Fucsina básica, Verde brillante, Verde de Malaquita, Cristal Violeta, Eosina, Azul de Metileno, Tionina, etc.
Los indicadores son sustancias químicas que varían de color según el pH del medio. Se utilizan en los medios diferenciales y permitenvisualizar, por cambios de color del medio de cultivo o de las colonias, la ocurrencia de distintas reacciones bioquímicas.

• Medir el pH del medio y verificar si corresponde al requerimiento de la fórmula.
• Los agares se pueden entubar en volúmenes de 18 – 20 ml o 5 ml. También se pueden esterilizar en matraces, frascos tapa rosca o placas Roux con volúmenes entre 100 a 1.000 ml.
• Taponarlos tubos con algodón cardé, los matraces y placas Roux con algodón cardé y gasa y luego tapar con papel craft.

DESARROLLO

En el laboratorio se hizo un medio de cultivo utilizando la forma del agar lactosado el cual se realizo utilizando vaso precipitado, 2 gramos de lactosa y 4,6 gramos de nutriente agar, luego se agrego agua destilada hasta completar 200ml y se calentó hasta el punto de...