microbiologia

5. FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS
5.1 OBJETIVO
Determinar la influencia de algunos factores fisicoquímicos como son la temperatura, pH y presencia de antisépticos en el desarrollo y crecimiento de microorganismos.
5.2 INTRODUCCIÓN
Para cada bacteria al ser cultivada para cualquier propósito es necesario proveer el ambiente bioquímico y biofísico apropiado. Dependiendode las necesidades especiales de cada bacteria particular se ha desarrollado una gran variedad y tipos de medios de cultivo con diferentes propósitos y utilizaciones. (1)
5.2.1 Temperatura, pH y antisépticos en medios de cultivo
Temperatura: El desarrollo de las bacterias depende de reacciones químicas, y la velocidad con quese efectúan estas reacciones está influida por la temperatura, por lo que la temperatura puede en parte determinar la velocidad de crecimiento de los microorganismos. Cada especie microbiana posee una temperatura óptima de crecimiento clasificándose según esto en los siguientes grupos:
• Psicrófilas: capaces de desarrollarse a 0° C o menos. Su temperatura óptima es alrededor de los 15° C.
•Mesófilas: crecen mejor entre 25 y 40° C.
• Termófilas: crecen mejor entre 45 y 60° C.
pH: Un microorganismo puede alterar el pH del medio de cultivo como resultado de las sustancias producidas por el propio microorganismo, por ejemplo:

Utilización de carbohidratos ----> Producción de ácidos orgánicos ----> Acidificación

Catabolismo de proteínas ----> Producción de materiales nitrogenados----> Alcalinización

Estos cambios pueden llegar a ser tan grandes que inhiban el crecimiento del microorganismo. (3)





Existe un tipo de clasificación para estos organismos de acuerdo al crecimiento óptimo debido al PH:

• Acidófilos: pH óptimo 1-4
• Neutrófilos: pH óptimo 5-7• alcalinófilos: pH óptimo 8-12


Antisépticos: reciben el nombre de antiséptico los biocidas que destruyen o inhiben el crecimiento de microorganismos. (2)


5.3 MATERIALES Y EQUIPOS

Equipo:
*Caja petri
*Probeta
*Mechero de bunsen
*Autoclave (Marca: ALL AMERICAN Modelo: No. 25X)
* Parrillaeléctrica (Marca: Cimarec Modelo: 89131325)
*Microscopio óptico (Marca: VELAB Modelo: VE-B1)

* Portaobjetos
Reactivos:
*Yodo-lugol
*Azul de algodón
*Safranina
*Alcohol-cetona
*Cristal-violeta




5.4 MÉTODOS
1. Se prepararon tres medios de cultivo con agar nutritivo, con pH neutro, con pH ácido de 5 y con pH básico de 8. Se hizo cada uno ajustando el pH con soluciones de HCl y NaOH1N respectivamente como se muestra en la figura 5.1.



Figura 5.1. Preparación de agar nutritivo.
2. Listos los agares se prosiguió a esterilizarlos como se ve en la figura 5.2. y posteriormente se vaciaron en 5 cajas petri (en tres cajas se agregó el medio de cultivo de pH neutro, en una caja se colocó medio de cultivo de pH ácido y en la caja restante secolocó el medio de cultivo de pH básico.) previamente esterilizadas. Cómo se muestra en la figura 5.2.



Figura 5.2. Esterilización de los agares.
3. Se dejaron enfriar y luego se sembró en cada una la cepa que fue proporcionada cómo se muestra en la figura 5.3.




Figura 5.3. Enfriado de medios de cultivo.
4. En uno de loscultivos neutros se colocaron en la superficie tres círculos de papel filtro impregnados con tres antisépticos (agua oxigenada, Merteolate, y Benzal).
5. Se incubaron por 48 horas a 36ºC las cajas con los antisépticos, el medio ácido y el medio básico.
6. Una de las cajas con medio neutro se puso a 6ºC y a temperatura ambiente la caja restante con medio neutro.
7. Después del tiempo...