Microbiologia

TABALA DE CONTENIDOS:

1. Tabla de contenido............................. 1
2. Introducción………………..….…..……. 2
3. Materiales y reactivos……..……...…… 3
4. Metodología…………………..…........... 4
5. Resultados……………………..……..….. 9
6. Discusión de resultados...................... 10
7. Conclusiones y recomendaciones…11
8. Apéndice………………………………. 12
9.Bibliografía........................................... 18

INTRODUCCION:
En la siguiente experiencia de laboratorio trataremos sobre la medición del crecimiento microbiano y para ello realizamos diferentes pruebas tanto a muestras de agua bebible como haces de ganado.
Es importante conocer el crecimiento microbiano en el agua bebible pues dependiendo dela cantidad que haya en esta y el crecimiento que tenga se puede calificar como agua saludable para beber o agua dañina para la salud; o en el caso de las heces ver si tienen un crecimiento en condiciones anaeróbicas y en ambos casos realizar un conteo de la cantidad de colonias que crecen por cantidad de muestra.
Utilizaremos los métodos de los tubos múltiples con caldo Lauril, filtración enagar Mac Conkey, reencuentro en placas sembrando con la espátula de drigalsky y utilizando la cámara de Neubauer para las muestras de agua bebibles; y para la muestra de heces cultivos anaeróbicos en medio tioglicolato, agar nutrivo de Brewer y en medio nutritivo.
Los métodos utilizados fueron seleccionados conociendo el tipo de microorganismos posibles que se pudieran encontrar en las muestras yporque son los más indicados para el conteo del crecimiento y con esto poder brindar un buen resultado acerca de la muestra.

MATERIALES Y REACTIVOS

HECES DE GANADO | MEDIO TIOGLICOLATO | SOLUCIÓN SALINA |

AGAR MAC CONKEY |
KLEBSIELLA | AGAR NUTRICIO |

AGAR BREWER |
VELA | LATA |
MICROSCOPIO |BATERIA GRAM |
MECHERO DE BUNSEN |

METODOLOGÍA
MÉTODO DE LOS TUBOS MÚLTIPLES
En cada tubo, agregar la cantidad indicada.

Caldo Lauril (g/L)
Triptosa 20.00
Lactosa 5.0
Cloruro de sodio 5.0
Lauril Sulfato, sal sódica 0.1
Hidrógeno fosfato dipotásico 2.75
Dihidrogeno fosfato potásico 2.75Luego de aproximadamente 48horas visualizamos el crecimiento:

Tabla NMP
(# de tubos positivos de 10, 1 y 0.1)
Reporte NMP/100mL

Se puede obtener:
(+)→crecimiento y gas
(-)→crecimiento sin gas
(-)→no hay crecimiento

FILTRACIÓN
Conteo de colonias
Reporte μfc/100mL

RECUENTO EN PLACA
Se realiza de la siguiente manera:

Luego de aproximadamente 48horas visualizamos el crecimiento:1. Seleccionamos aproximadamente de 30-300 colonias
2. Se realiza el recuento utilizando la cámara de Neubauer

CULTIVOS DE ANAEROBIOS

Luego de aproximadamente 48 horas visualizamos el crecimiento:

RESULTADOS
* CULTIVO DE ANAERÓBIOS:
* AGAR BREWER: se observo el crecimiento deClostridium
* AGAR NUTRITIVO – KLEBSIELLA: Se encontró un crecimiento menor que en el agar Brewer.
* MEDIO TIOGLICOLATO: no se logro observar los resultados por falta de tiempo, pero se realizaron las pruebas de gran y coloración de esporas por el método de Wirtz – Conklin.
* RECUENTO DE MICROORGANISMOS:
Tubo [10] = 3
Tubo [1] = 3
Tubo [- 1] = 0

100 x 6 0.3 x 33.3=100 x 6 3 x 16=189.83 = 190

* AGAR NUTRITIVO 59 Colonias

-1 | -2 | -3 |
- | 6 | 6 |

Número de células x Inversa de la Dilución x inóculo


35 x 102 x 101 x 0.1-1
35 x 104=35 x 103
* RECUENTO DE MICROORGANISMOS EN LA CÁMARA DE NEUBAVER:
335 partículas en la cámara
Células M. µl=...