Microbiologia

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE INGENIERIA

E. A. P. INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

PRACTICA 01

TITULO:

TECNICAS DE OBSERVACION EN MEDIOS LIQUIDOS

ASIGNATURA:

MICROBIOLOGIA GENERAL

ALUMNO:

GONZALES DURAND JESUS JOAQUINPROFESOR:

BGO. CARLOS AZAÑERO

CICLO:

V

2008

TECNICAS DE OBSERVACION EN MEDIOS LIQUIDOS

I. INTRODUCCION:

Se puede obtener información rápida a través de la observación microscópica de la muestra sin teñir, para la búsqueda de hongos, bacterias y parásitos. La muestra se suspende en suero fisiológico, ensolución de KOH, o bien en tinta china.

La suspensión en suero fisiológico permite demostrar la presencia de Tricomonas Treponemas. Para estos últimos, además, se recomienda la observación en campo oscuro.

Los medios líquidos favorecen el crecimiento de microorganismos pero no pueden utilizarse para el aislamiento de gérmenes y la obtención de colonias, sino para observar el tipo derespiración; aerobios estrictos, anaerobios estrictos, mircoaerofilos y anaerobios facultativos.

II. OBJETIVOS:

• Preparar un montaje húmedo y gota pendiente de una muestra microbiana.
• Ejecutar adecuadamente la técnica aséptica en una preparación microscópica de una muestra microbiana.
• Obtener destrezas en la observación de montaje húmedo gota pendiente de una muestramicrobiana.

III. MATERIALES:

Muestras Biológicas:

• Suspensión de Bacillus subtilis (bacterias).
• Suspensión de Saccharomyses cerevisiae (levaduras).
• Cultivo fúngico (moho).
• Agua estancada (algas y protozoarios).

De vidrio, equipo y otros:

• Láminas portaobjetos.
• Láminas con depresión.
•Pipetas Pasteur.
• Microscopios compuestos.
• Mecheros.
• Azas bacteriológicas.

IV. PROCEDIMIENTO:

MONTAJE HUMEDO

➢ Flamea una aza bacteriológica hasta el rojo vivo, frente a un mechero de Bunsen. Espera que se enfrié.
➢ Con la misma mano, teniendo el aza estéril, sin que esta choque con algún objeto, extrae el algodón o el tapón de untubo que contiene la suspensión microbiana de Bacillus Subtilis, mientras que la otra mano sostiene el tubo.
➢ Luego siempre frente al mechero, extrae una azada de la suspensión y vuelve a flamear el aza y depositarlo en el lugar correspondiente.
➢ Coloca la laminilla cubreobjetos encima de la muestra y observa con el objetivo de 10X, luego de 40X, ajustando la intensidad deluz.
➢ Esquematiza tus resultados anotando sus formas, tamaños y movimientos.
➢ Proceda en forma similar con la suspensión de Saccharomyses cerevisiae.
➢ Al concluir la experiencia práctica, quitar la grasa con xilol de las láminas portaobjetos y laminillas.

GOTA PENDIENTE

➢ Obtener una lamina portaobjeto con una depresión en el centro.
➢Coger una pequeña cantidad de grasa de petróleo (o vaselina) con un mondadientes y embalumarlo en los contornos de una laminilla.
➢ Colocar la laminilla sobre una toalla de papel, son la grasa hacia arriba.
➢ Asépticamente, transferir varias azadas de la suspensión de Saccharomyses cerevisiae, en el centro de la laminilla anterior.
➢ Anotar una ligera marca en losbordes de la gota con un lápiz de cera.
➢ Colocar la lamina con depresión encima de la laminilla y suavemente verterlo en sentido opuesto; de tal modo que la gota quede suspendida hacia abajo.
➢ Examinar con el objetivo de 10X, localizando la marca hecha con el lápiz de cera en la gota. Mover hacia el centro.
➢ Reducir la entrada de luz con el iris del diafragma....