Microbiologia

INTRODUCCIÓN
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivoartificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
Las bacterias contenidas en un producto patológico necesitan una serie de compuestospara su desarrollo (una fuente de carbono, nitrógeno, elementos minerales y factores de crecimiento). Un medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes, en los que crecen y se multiplican los microorganismos en el laboratorio, con objeto de aislar las diferentes especies bacterianas, proceder a su identificación y llevar a cabo una serie de estudios complementarios..
La mayoría de lasbacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano .El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. También se añaden colorantes que actúan como indicadores para detectar, por ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol seusa como indicador ya que es rojo en pH básico y amarillo en pH ácido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram-positiva
.

MATERIALES Y METODOS
* Papel ilumino.
* Hisopo estéril.
* Marcador indeleble.
* Yesquero.
* Mechero.
* Capsula de petri.
* Agar Mc conkey (AMC).
* Caldo nutritivo (CN).* Tubo de ensayo.
* Gradilla.
* Tirro.
* Algodón.
* Vaso precipitado.
* Lamina porta objeto.
* Microscopio.
* Autoclave.
* Esterilizador.
* Alcohol.

SUSTANCIAS:
* Agar Mc conkey (AMC).
* Caldo Nutritivo (CN).

METODOLOGIA
Preparación de medios de cultivo y esterilización
Agar Mc conkey:
* Se coloco un Becker en el peso y se leagrego 12,5 gr del agar Mc conkey.
* Seguidamente en una fiola de 500 ml se le fue agregando agua destilada.
* Luego poco a poco los 12,5 gr de Mc conkey en 250 ml de agua destilada.
* Posteriormente agitamos la fiola, procedimos a colocarle el algodón para que no se contamine y el papel aluminio para que no se evapore.
* Después lo colocamos en un mechero para que se disolvieratodo el agar y se agito para evitar que se quemara, ya para finalizar se dejo reposar.
* Este medio es más denso porque la proporción de agar es mayor por eso tardamos un poco más en calentarlo.
Siembra de un medio liquido a solido (Diseminación en estría)
* Se esterilizo un asa de siembra en la llama de un mechero.
* Luego se introdujo en la suspensión bacteriana  (cepa) pararecoger una muestra.
* Se sembró sobre la superficie de un medio sólido en una placa Petri, haciendo estrías en zigzag.
* Se vuelve a esterilizar el asa, tocando en la zona de la placa ya sembrada y hacer un segundo grupo de estrías en una región nueva de la placa.
* Repitiendo este proceso varias veces se logra separar células individuales.
* Las placas se colocaron en la incubadorapor 24 horas, permitiendo que estas células experimentaran un número suficiente de divisiones para formar colonias visibles.

Siembra del medio solido a líquido

* Se esterilizo un asa de siembra en la llama de un mechero.
* Luego se introdujo en el tubo de ensayo el cual contenía el BHI
* Se sembró sobre la superficie de un medio sólido en una placa Petri, en donde se...