microbiologia


METODOS DE ESTERILIZACIÓN Y PREPARACIÓN DE MATERIAL.

Derben Manchego A, Raúl Martínez B, Daniel Vergara S

Programa de Enfermería, facultad ciencias de la salud, Universidad de sucre – Colombia. *Correspondencia: vergaraads@gmail.com
INTRODUCCIÓN
Los microorganismos como otros seres vivos, son susceptibles a los cambios de condiciones ambientales y en la medida en que se han podidoadaptar a estos cambios, se han distribuido en una gran diversidad de hábitats incluyendo los de condiciones extremas sobre todo tipo de físico y químico. Los microorganismos estudiados en el laboratorio por lo regular son heterótrofos, ya que requieren de compuestos complejos como fuentes de carbono y nitrógeno. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio deCultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuado,  así como un grado correcto de acidez o alcalinidad.(#)
Se han desarrollado y aplicado diversos procesos de esterilización para eliminarlos. La esterilizaciónes un método de eliminación total de todo tipo de organismo y que asegura la ausencia absoluta de cualquier forma viviente; La esterilización con calor seco y húmedo son los procedimientos de mayor utilización en Microbiología. El calor seco desnaturaliza las enzimas y destruye los microorganismos por oxidación, estos métodos se aplican principalmente en la esterilización de asas de inoculación ytodo tipo de material de vidrio y quirúrgico; Los procesos con calor húmedo se aplican para esterilizar medios de cultivo, soluciones y cultivos bacterianos que se desechan, el más recomendable es el autoclave en el que se utiliza vapor de agua a presión para alcanzar temperaturas de 121°C. El material se deja a esta temperatura durante 15 minutos para asegurarse de la destrucción de endoesporas,que son las estructuras bacterianas más resistentes al calor.(*)
Cuando se requiere esterilizar diferentes materiales sensibles al calor como las soluciones de vitaminas, aminoácidos, etc. se esterilizan por filtración en membranas estériles de 0.2 micras de diámetro y para el caso de materiales plásticos es recomendable el uso de gases como óxido de etileno o con radiaciones gamma. Lassuperficies generalmente se desinfectan con radiaciones UV. o compuestos químicos en forma líquida como: los fenoles, compuestos cuaternarios de amono, alcoholes, halógenos y detergentes. (&)
Esta práctica tiene como objetivo aprender a manejar el material que se va a esterilizar y los métodos de esterilización.

MATERIALES Y MÉTODOS.
Se procedió a leer cuidadosamente la etiqueta del envase del mediode cultivo deshidratado,para calcular la cantidad necesaria para preparar 50 ml de caldo, se realizaron las distintasconversiones las cuales dieron como resultado 2.7 g en 50 ml de agua destilada (ver grafica 1), se procedió a pesar los 2.7 g de peptona de caseína (solido) en la balanza (ver figura 1) seguidamente se midieron 50 ml de agua destila con una probeta. Los 50mlde agua destilada sedepositaron en un Baker al cual se le agregaron los 2.7g de peptona de caseína, seprocedió a disolvercon un agitador de vidrio hasta lograr una mezcla homogénea (ver figura 2), luego se tomaron 3 tubos de ensayo y se les agrego a cada uno 10 ml de la mezcla yseguidamente se procedió a llevar estos tubos de ensayo a la autoclave, donde se llevó a cabo el proceso de esterilización (ver figura3).54 g---------1000ml
X ---------50ml
X=
X= 2.7g
Gráfica 1: operación matemática empleada para calcular los gramos necesarios para mezclarlos en 50 ml de agua destilada.





Figura 1: balanza pesando y marcando exactamente los 2.7 gramos de peptona de caseína necesarios para preparar la mezcla.


Figura 2: proceso de mezcla para obtener la sustancia homogénea.



Figura...