Microbiologia

TAREA ENSAYOS MICROBIOLÓGICOS
1ª EVALUACIÓN
Actividad 1: Busca información en Internet sobre las pruebas bioquímicas de
identificación de bacterias:

Prueba
Catalasa

Principio o
fundamento

Método

Utilización más
frecuente

Detecta la enzima
Existen 2 métodos:
Esta prueba se utiliza para
catalasa, que es una
diferenciar entre los
enzima que poseen la Método del
siguientesgéneros:
mayoría de las bacterias portaobjetos:
Streptococcus (-) de
aerobias. Descompone
Micrococcus (+) y/o
el peróxido de
Con el asa de
Staphylococcus (+)
hidrógeno en agua y
siembra recoger
Bacillus (+) de
oxígeno. El
el centro de una
Clostridium (-)
desprendimiento de
colonia pura de
Lysteria
burbujas procedentes
18-24 horas y
monocytogenes (+)
del oxígeno indica quecolocar sobre un
y/o Corynebacterium
la prueba es positiva.
portaobjetos
(+, con las
limpio de vidrio.
excepciones de
Agregar con
C.pyogenes y
gotero o pipeta
C.haemolyticum,
Pasteur una gota
ambos -) de
de H2O2 al 30%
Erysipelothrix (-)
sobre el
microorganismo
sin mezclarlo
con el cultivo.
Observar la
formación
inmediata de
burbujas
(resultado
positivo).
Desechar elportaobjetos en
un recipiente con
desinfectante.
Si se invierte el
orden del
método
(extender la
colonia sobre el
agua oxigenada)
pueden
producirse falsos
positivos.
Método del tubo de
ensayo:
Agregar 1ml de
H2O2 al 3%
directamente a

un cultivo puro
de agar en slant
densamente
inoculado.
Observar la
formación
inmediata de
burbujas
(resultado
positivo).
Utilización del citratoEsta prueba sirve para Inocular el tubo con
Se utiliza para la detección de
determinar si un
agar citrato de Simmons enterobacterias de los
organismo es capaz de realizando siembra por siguientes géneros:
utilizar citrato como
estría tomando una
Enterobacter,
única fuente de carbono colonia del
Klebsiella, Serratia,
y compuestos
microorganismo en
Citrobacter y algunas
amoniacalescomo
estudio. Incubar a 37
especies de
única fuente de
grados C por 24 horas.
Salmonella. Sin
nitrógeno en su
El desarrollo de un color
embargo, Escherichia,
metabolismo,
azul intenso en 24-48
Shigella, Salmonella
provocando una
horas indica una prueba
typhi y Salmonella
alcalinización del medio. positiva y revela que el
paratyphi son
microorganismo en
incapaces de crecer
estudioha sido capaz
con esos nutrientes.
de utilizar el citrato en el
medio con la formación
de productos alcalinos.
La prueba también es
positiva en ausencia de
color azul si existe
crecimiento del
microorganismo a lo
largo de la estría de
inoculación
Prueba de indol
Mediante esta prueba Para la realización de Se utiliza para detectar
se detecta la liberación esta prueba la bacteriabacterias que poseen las
de indol en un cultivo
se cultiva durante 24-48 enzimas denominadas en su
bacteriano. Dicha
horas en un caldo de
conjunto triptofanasas
liberación se debe a la triptona con NaCl al
degradación del
0,5% (la triptona
aminoácido triptófano presenta abundante
mediante el enzima
triptófano). Para la
triptofanasa
posterior detección del
indol se usa el reactivo
deKovacs que se
puede preparar con los
siguientes ingredientes:
Alcohol amílico o
isoamílico
(puede
sustituirse por
alc.butílico)
150ml
p-dimetilaminobenzaldehído
10g
HCl
(concentrado) 50
ml
Se disuelve primero el
aldehído en el alcohol y

después se agrega
lentamente a esta
mezcla el ácido. Para el
control de calidad del
reactivo se pueden
utilizar cultivos
conocidos. Las másconvenientes son
Escherichia coli (indol+)
y todas las especies de
Klebsiella (indol-).
Si la bacteria posee la
enzima triptofanasa, al
añadir al medio 5 gotas
del reactivo de Kovacs,
se producirá un anillo de
color rojo en la
superficie del caldo y la
prueba será
considerada positiva
Prueba del rojo de
Determinar la capacidad Se cultiva el
Se utilizan para diferenciar
metilo
de...