microbiologia





“Aislamiento y transferencia de microorganismos; subcultivo e. coli”.













Asignatura: Microbiología
Profesor: Valia Vivar
Alumnos: Carolina Báez, Aníbal Molina

Valparaíso, 24 de Noviembre 2013
Introducción
En microbiología, cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo de éste en medios de cultivo y condiciones delaboratorio controladas. La población de microorganismos desarrollada en un medio se denomina cultivo. Cuando éste contiene una sola especie de microorganismo, se denomina cultivo puro o axénico, cuando contiene más de una especie de microorganismos se denomina cultivo mixto. Un cultivo tipo contiene una especie conocida de microorganismos que es conservada en el laboratorio para realizar diversos ensayos yestudios.
Un cultivo axénico se obtiene artificialmente en el laboratorio. A la hora de obtener un cultivo axénico se han de tomar precauciones especiales, ya que los microorganismos están por todas partes, en la naturaleza, en el laboratorio y en los instrumentos y recipientes usados en los experimentos. Estos microorganismos no deseados o contaminantes deben ser eliminados de un cultivo paraque éste pueda ser axénico. El segundo paso para obtener un cultivo axénico es inocular o introducir, una sola célula de un microorganismo en un medio sólido o líquido, esterilizado previamente. De esta manera, aislamos un solo microorganismo del resto y se podrá multiplicar en condiciones favorables. Un clon está constituido por una población de células descendientes de un solo microorganismo.Una colonia es un clon lo suficientemente grande como para ser visible sobre la superficie de un medio sólido .Un cultivo microbiano que ha estado creciendo por cierto tiempo en el mismo tubo o matraz, debe ser transferido a un medio de cultivo nuevo, de otra manera el crecimiento y sobrevivencia no pueden continuar. En esta transferencia se deben considerar dos aspectos básicos referentes a: nointroducir microorganismos indeseables (contaminantes) y concentración o carga microbiana de la muestra (inóculo) a sembrar.
Objetivos
Reconocer los procedimientos necesarios para el aislamiento y trasferencia de microorganismos a un medio de cultivo sólido y líquido.
Aplicar las técnicas de cultivo entregadas, para la replicación de un medio de cultivo de E. coli

Examinar las coloniasobtenidas de los subcultivos para su posible caracterización.



Procedimiento

Materiales:
Delantal
Placa de Petri
Tubos de ensayo
Mechero
Muestra de E.coli
Rejilla para tubos de ensayo
Fósforos
Asa

Procedimientos:
Ante cualquier procedimiento en el laboratorio es de suma importancia que los estudiantes tengan el cabello tomado si es que lo tiene largo, su delantal abotonadopor si cae alguna muestra sobre su vestimenta.

Medio líquido en tubo
Flamear la boca del tubo
Esterilizar el asa
Introducir el asa al tubo con el agar nutritivo y la muestra de E.coli
Agitar el tubo con la muestra nueva de E.coli
Flamear la boca del tubo y cerrar
Esterilizar el asa
Colocar en rejilla para estabilizarlo.

Medio solido en placa
Estriado:
Flamear la Placa porel perímetro de de la circunferencia. Para esterilizar el área.
Esterilizar el asa colocándolo en el mechero hasta que la zona metálica se torne rojiza.
Enfriar el asa en la tapa superior de la placa de Petri desde dentro, teniendo cuidado de que la abertura de la placa este dirigida hacia la flama del mechero.
Se toma el tubo con agar nutritivo y la muestra de E.coli y se saca unamuestra desde el final del tubo con el asa enfriada.
Se abre la tapa de la placa de Petri con la boca hacia la flama del mechero y se aplica el asa con la muestra de E. coli. Dejando una estría central en el agar nutritivo de la placa de Petri.
Luego se cierra, se nombra y se fecha.
Líneas paralelas
Flamear la Placa por el perímetro de la circunferencia. Para esterilizar el área....