Microbiologia

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Los agentes físicos que consiguen la esterilización de materiales son el calor , las radiaciones y la filtración.
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Esterilización por calor
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El calor desnaturaliza estructuras y macromoléculas (membranas, proteínas, etc.). Todos losmicroorganismos son susceptibles a la acción del calor. Su sensibilidad varía con la especie y con el estado en que se encuentren.
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En general las formas vegetativas bacterianas mueren por calentamiento a 50-70ºC. Las endosporas, ( las formas de vida más termoresistentes), requieren mayores temperaturas y tiempo de exposición. El calor puede utilizarse de dosformas en presencia ( esterilización por calor humedo) o ausencia de humedad ( esterilización por calor seco).
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Calor húmedo
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Los materiales húmedos conducen mejor el calor que los secos : el agua tiene mayor coeficiente de transferencia de calor que el aire. Por eso el vapor de agua es más eficazque el calor seco matando a los microorganismos. Así la esterilización en presencia de vapor de agua requiere menos temperatura y tiempo que sin agua. El autoclave de vapor utiliza calor húmedo para la esterilización.
Autoclave de vapor
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Trabaja a presión superior a la atmosférica. El agua a presión atmosférica hierve a 100ºC. A presionessuperiores, la temperatura de ebullición aumenta por lo que se pueden calentar soluciones acuosas (como los medios de cultivo) a temperaturas superiores a 100ºC. El autoclave permite elevar la presión de una a dos atmósferas sobre la presión atmosférica.

El dispositivo trabaja aislado del exterior. En un sistema aislado del exterior, cada elevación de temperatura provoca un aumento de presión. Larelación entre temperatura y presión depende de la composición de la atmósfera incluida en el sistema.

Cuando en el autoclave el aire es reemplazado por vapor de agua, La relación entre temperatura y presión en atmósfera saturada de agua es la indicada en la tabla de la izquierda.
PRESIÓN (ATM) EN EL INTERIOR | TEMPERATURA (ºC) |
0.5 | 112 |
1 | 121 |
2 | 133 |-------------------------------------------------
Si quedan restos de aire son necesarias temperaturas mayores para provocar la misma presión en el interior.
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Empleo del autoclave
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El autoclave de vapor es el aparato más utilizado para la esterilización demedios de cultivo, soluciones, ropa de laboratorio, y emulsiones queno se desnaturalicen a temperaturas superiores a 100ºC.. En general la esterilización de estos materiales se realiza a (112-121ºC) durante 30-20 minutos. Estas condiciones pueden variar en función del tipo de material, carga microbiana y volúmenes a esterilizar.
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Ventajas de autoclave
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Rápidocalentamiento y penetración del calor, destrucción de bacterias y endosporas en corto tiempo, no deja residuos tóxicos, poco deterioro del material expuesto, es económico.
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Inconvenientes Corrosivo sobre ciertos materiales metálicos, no útil para material termosensible.
Tindalización o esterilización fraccionada a vapor fluente-------------------------------------------------
El material se calienta a 80-100º durante 30 minutos, en días sucesivos, con periodos de incubación entre ellos. De esta manera se destruyen las células vegetativas pero no las endosporas termorresistentes.
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Las endosporas que sobrevivieron pueden germinar en el periodo de incubación. Desdiferenciadas como células...