Microbiologia

OBJETIVOS:

1. Iniciación en las técnicas del estudio de microorganismos: cultivo,
tinción y morfología.
2. Conocimiento en la preparación de medios de cultivo, Técnicas de
sembrado e Identificación bacteriana.
3. Habilidad en la toma de muestra para esputo, raspado de piel y
secreciones.
4. Conocimiento de los Hongos, Bacterias, virus, parásitos aplicados en
microbiología.
5. Análisisde la sensibilidad "in vitro" a los antibióticos y otros fármacos
(antibiograma).
6. Comprensión de la necesidad del uso racional de los antibióticos.

Jackelinevelasqueznavarro@yahoo.com

Page 1

Microbiología
El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el
microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre lacélula y el medio
que la rodea.
El modo más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes. Si se desea
simplemente aumentar el contraste de las células para la microscopía, son suficientes los
procedimientos que usan un solo colorante llamado de tinción simple. Es el proceso
denominado tinción diferencial. Uno muy usado en microbiología es la tinción Gram.
Basándose en sureacción a la tinción Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos:
grampositivas y gramnegativas. Esta tinción tiene gran importancia en taxonomía bacteriana
ya que indica diferencias fundamentales de la pared celular de las distintas bacterias.
Mientras que las bacterias gramnegativas son constantes en su reacción, los
microorganismos grampositivos pueden presentar respuestas variables enciertas
condiciones (son gramlábiles). Por ejemplo, los cultivos viejos de algunas bacterias
grampositivas pierden la propiedad de retener el cristal violeta, y en consecuencia, se tiñen
por la safranina apareciendo como gramnegativas. Análogo efecto se produce en ocasiones
por cambio en el medio del organismo, o por ligeras modificaciones en la ejecución de la
técnica.
Por este motivo, espreciso atenerse, en la práctica, al procedimiento establecido. Para
explicar el mecanismo de la tinción de gram se han propuesto varias hipótesis fundadas en la
naturaleza química de las paredes celulares de los microorganismos.
Aquí puedes ver las diferencias estructurales y químicas de los dos tipos de pared
bacteriana:

Pared Gram +
Ácidos teicoicos
Polisacáridos
Proteínas (pocas veces)Glicopéptido (50% del peso seco)

Pared -Gram Negativa
Capa interna delgada de 20 a 30
A cubierta por capas externas de
densidad menor)
Lipopolisacáridos
Lipoproteínas
Proteínas
Glicopéptido (10% del peso seco)

Jackelinevelasqueznavarro@yahoo.com

Page 2

Tipo de Microscopio
- Microscopia de campo oscuro: Condensador de campo oscuro
- Microscopia de Fase y de Fluorescencia:Condensador de campo oscuro: debajo de este
Se adaptan excitadores
- Fluorescencia: Sistemas de Filtro: de exitacion y de barrera
- Método Directo mediante anticuerpos
- Fuente de luz ultravioleta: lámpara de arco de mercurio de alta presión lámparas de
Mercurio de Bajo poder
- Microscopio de luz Polarizada: Filtro: Polarizante: Ubicado: entre la fuente de luz

y

Muestra
-FiltroPolarizante: Ubicado: Objetivo y Observador

Jackelinevelasqueznavarro@yahoo.com

Page 3

Tinción GRAM: Bacterias Gram-Positivas
Cocos Gram-positivos
Cadenas: forma típica de Streptococcus sp, como S. pneumoniae, Streptococcus grupo B

Racimos: forma típica de Staphylococcus sp, como S. aureus

Tétradas: forma típica de Micrococcus sp

Bacilos Gram-positivos
Gruesos: forma típica deClostridium sp, como C. perfringens, C. septicum

Finos: forma típica de Listeria sp

Jackelinevelasqueznavarro@yahoo.com

Ramificados: forma típica de
Actinomycetes y Nocardia, como A. israelii

Page 4

PRACTICA Nro.1
COLORACION DE GRAM
Objetivos: Adscritos al silabo de la clase Microbiología

1- Enunciar los pasos de la coloración de gram:

2- Esquematice la morfología que...