Microbiologia

INTRODUCCION

Para el estudio de los microorganismos es necesario la observación de los mismos a través del microscopio, sin embrago uno de los principales obstáculos para llevar acabo esta labor es la falta de coloración o la falta de contraste de la mayoría de los organismos con el medio que le rodea. Es por esto que una técnica comúnmente implementada en la observación con microscopioóptico es la utilización de colorantes con propiedades químicas especificas.
Antes de teñir cualquier célula, es necesario la fijación o inactivacion de las células utilizando un agente fijador, que en el caso de las bacterias es común mente utilizado calor pero también pueden utilizarse disolventes como alcoholes, ácidos y formaldehido. La muestra depositada en la superficie de un portaobjetos escalentando sobre la flama directa de un mechero por unos pocos segundos, o cubierta con el diluyente y dejándola secar a temperatura ambiente. La fijación de las células produce regularmente el encogimiento de las mismas por lo que no aportan datos precisos sobre las dimensiones de los microorganismos.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad especificapor los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente y se combinan positivamente y se combinan con intensidad con los componentes acidos. Ejemplos decolorantes cationicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente y se combinan con los constituyentes celulares cargadospositivamente, tales como muchas proteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, lafucsina ácida y el rojo Congo.
Algunos colorantes funcionan mejor, es decir que tiñen mejor las células bajo ciertas condiciones o con el tratamiento previo de la muestra con otras sustancias químicas.
Además de los métodos de tinción, existen otras técnicas para facilitar la visualización de los microorganismos ysus estructuras celulares, tal es el caso de los métodos conocidos como de tinción negativa en cuyo caso es el medio en el que se encuentran las bacterias el que es teñido un color contraste.
Las técnicas de tinción pueden ser divididas según su objetivo, entonces diferenciamos tres tipos de tinción: simple, diferencial y selectiva.
La tinción simple consiste en la utilización de únicamente uncolorante, el cual es esparcido sobre la muestra y posteriormente barrido con agua, lo que produce la reacción de algunas estructuras orgánicas las cuales retienen el colorante. Dos de los colorantes mas utilizados para este tipo de tincion es el azul de metileno (cloruro de metiltionina) y lanigrosina.
La tinción diferencial es otra de las técnicas de suma importancia para el estudio demicroorganismos. Consiste en la utilización de dos o mas colorantes que produzcan la diferenciación o discriminación entre géneros o especies de microorganismos a estudiar. Entre estos métodos se encuentra la coloración de Gram, Que es sumamente importante en microbiología. Este método entre las células gram positivas y las células gram negativas, es generalmente utilizado debido a que muchas de lascélulas patógenas son del tipo gram negativas, aparte de esta diferencia la células gram positivas son mas susceptibles ala penicilina y
mas resistentes ala acción mecánica y exposición a algunas enzimas que las gram negativas. La forma en que se realiza este método es aplicando cristal violeta a la laminilla , luego se aplica yodo como colorante, luego se lava con alcohol, para finalmente añadirleun colorante de contaste. En general, se obtienen bacterias de color rojo y violeta. Las células gram negativas pierden el cristal violeta durante el lavado, porlo tanto aparecen rojas ante el contraste de la safranina, las células gram positivas retienen el cristal violeta, por lo tanto se observan violeta profundo.
Otro tipo de coloración diferencial es el método de acidorresistencia, que...