Microbiologia

DE LA INTEGRACION NACIONAL Y EL RECONOCIMIENTO DE NUESTRA DIVERSIDAD”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA – SULLANA

COLORACIONES

CURSO:
MICROBIOLOGIA GENERAL

PROFESOR:
JORGE BERMEJO

ESCUELA:
ING. INDUSTRIAL

FACULTAD:
ING. AGROINDUSTRIAL

ALUMNO:JONATTAN
CICLO:
IV

INTRODUCCION

Las coloraciones o tinciones son técnicas que permiten observar microorganismos en función de la capacidad de los mismos para retener o no determinadas sustancias colorantes, lo que depende de la carga de la célula y del colorante.

En general, las bacterias y otros microorganismos son transparentes, lo quedificulta su estudio cuando los exámenes se realizan en fresco. La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorante. Por esta razón, cuando se quieren conocer los detalles morfológicos es necesario recurrir a tinciones. La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen algunaafinidad específica por algún componente celular.

Estos pueden emplearse para distinguir entre tipos diferentes de células o para revelar la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas, paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc.

Existen varios tipos de colorantes, pero los más usados en microbiología son:

a) Sales colorantesb) Colorantes liposolubles

a) Los colorantes más comúnmente usados son sales que pueden ser de tipo ácido o básico, términos que no indican necesariamente su pH en solución, sino que una parte significativa de la molécula sea aniónica o catiónica. Los colorantes básicos consisten en un catión coloreado unido a un anión incoloro (ej. clorhidrato (-) de azul de metileno (+).Los colorantes ácidostienen el catión incoloro unido a un anión coloreado (eosinato (-) de Na (+).Los colorantes se combinan químicamente con el protoplasma bacteriano; si la célula no ha muerto, el proceso de tinción la mata. La célula bacteriana posee constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleícos y los polisacáridos ácidos, y ellos son los más usados en citología bacteriana. Lasbacterias son ricas en ácidos nucleícos que poseen cargas negativas en forma de grupos fosfatos. Los colorantes básicos tiñen la célula bacteriana uniformemente, a menos que antes sea destruido el ARN del citoplasma. Los colorantes ácidos no tiñen la célula bacteriana, y por lo tanto, pueden usarse para impartir al fondo un color de contraste (coloración negativa).Desde el punto de vista prácticoentonces, los colorantes básicos tiñen estructuras de naturaleza ácida, como la cromatina nuclear de las células eucariotas y procariotas; los colorantes ácidos reaccionan con sustancias básicas, como las estructuras citoplasmáticas de las células eucariotas.

b) Los colorantes liposolubles se combinan con los componentes lipídicos de la célula, usándose a menudo para revelar la localización delos depósitos de grasa. Ej. Negro Sudán. En algunos casos se usan mordientes con la finalidad de engrosar estructuras muy finas, con el propósito de hacerlas visibles al microscopio óptico; uno de ellos es el ácido tánico que se emplea en la coloración de flagelos y espiroquetas.

Preparación de Frotis Bacteriano para Coloración:
Antes de la coloración hay que realizar la preparación y lafijación del frotis. La preparación del frotis consiste en extender homogéneamente la muestra (por ejemplo un cultivo bacteriano) o una suspensión de la misma sobre una lámina. Una vez preparado el frotis debe secarse y fijarse (por ejemplo con calor).

Con la fijación del frotis se pretende obtener la muerte de los microorganismos, la adhesión a la lámina y la conservación de su morfología. Después...