Microbiologia

Practica Nº 06

FRACIONAMIENTO CELULAR
1.- INTRODUCCION:
Estos métodos consisten en la separación y aislamiento de diversos componentes, celulares para su posterior estudio mediante técnicasbioquímicas o de biología molecular. Se basan esencialmente en la homogeneización de los tejidos y la destrucción de los límites celulares por medio de diferentes procedimientos mecánicos o químicos,con anterior separación de las fracciones subcelulares de acuerdo con su masa, superficie y peso especifico (Robertis, et.al.1997).
Actualmente se utilizan diversos métodos de fraccionamiento celular.La mayoría están basados en la homogeneización mecánica de la célula generalmente en sacarosa a diferentes concentraciones (Robertis, et.al.1997).
Un procedimiento corriente de fraccionamiento espor centrifuga diferencial, este tipo de fraccionamiento celular se utiliza para subdividir a los componentes celulares en cuatro fracciones diferentes: nuclear, mitocondrial, microsómica y soluble;según la fuerza de gravitación requerida se utilizan para tal fin centrifugas ordinarias o preparativas, antes de la centrifugación todas las partículas están distribuidas homogéneamente, pero a medidaque tiene lugar la centrifugación se depositan de acuerdo con sus respectivas velocidades de sedimentación (Robertis, et.al.1997).
Durante la centrifugación se utilizan altas velocidades y losorganelos mayores y más densos sedimentan primero para luego volver a centrifugar el sobrenadante a mayor velocidad, obteniéndose de este modo por centrifugaciones sucesivas diferentes fracciones celulares.La primera fracción en obtenerse es la de los núcleos, la segunda de mitocondrias y lisosomas, la tercera de membranas del sistema vacuolar y finalmente la fracción correspondiente a los ribosomas(Morales & Zapata,1996).

2.- OBJETIVOS:
2.1 Objetivos Generales: - Ídem Guía
2.2 Objetivos Específicos:
* Aislar componentes celulares como el núcleo, las mitocondrias (célula...