Microbiologia

13 de septiembre de 2011

Práctica 3: Preparación de medios de cultivo y material estéril

Introducción
Medio de cultivo
Un medio de cultivo consiste en un gel o una solución que cuenta con los nutrientes necesarios para permitir (bajo condiciones favorables de pH y temperatura) el crecimiento de virus, microorganismos, células o incluso pequeñas plantas. Según qué se quiera hacer crecer,el medio requerirá unas u otras condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados, al prepararse podemos encontrarlos en estado sólido, semisólido y líquido.
Según sus cualidades físicas distinguimos:
Líquidos
* Semi-sólidos
* Sólidos
Según su formulación:
* Químicamente definidos: se conoce exactamente la cantidad de cada unode los compuestos que hay en el medio.
* Complejos: se realizan a partir de extractos naturales (extracto de levadura, sangre,...). Por tanto, no se conoce exactamente cual es la composición del medio. Sin embargo, presenta la ventaja de que ya están presentes todos o casi todos los elementos que una célula puede requerir.
Según su uso:
* Medio General: Es aquel medio donde crecen todotipo de microorganismos, excepto aquellos que necesitan de unas condiciones especiales.
* Selectivos: Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas en una población polimicrobiana. El fundamento de estos medios consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de una población microbiana específica. Un ejemplo de medio selectivo es el caldo selenito, quese utiliza para favorecer el crecimiento de salmonellas y frenar el del resto de enterobacterias.
* Diferenciales:Se utilizan para poner en evidencia características bioquímicas que ayuden a diferenciar géneros o especies. La adición de un azúcar fermentable o un sustrato metabolizable se utilizan para este fin. El medio MacConkey es un medio diferencial porque permite distinguir los gérmenesque fermentan la lactosa de aquellos que no lo hacen. También lo son el C.L.E.D. (lactosa +/lactosa -), el agar sangre (tipo de hemólisis), el SS (que es doblemente diferencial), etc.Permiten identificar una especie o grupo por su crecimiento ya sea por su metabolismo, respiración, etc.
* De enriquecimiento: se utilizan para aislar un tipo particular de microorganismos a partir de unapoblación mixta de gran tamaño. Pueden usarse, por ejemplo, para estudiar todos los microorganismos presentes en una muestra.
* Mínimo: contienen la mínima cantidad de nutrientes posible que permite el crecimiento de una especie.
* De transporte: está preparado para servir de almacenamiento temporal a especímenes transportados. manteniendo su viabilidad y su concentración.
* Simple

AgarEosina Azul de metileno
El Agar Eosina y Azul de Metileno es un medio utilizado para el aislamiento y diferenciación de bacilos entéricos Gram negativos. Este medio también es conocido como Agar EMB por sus siglas en inglés.
La fórmula original del Agar EMB fue desarrollada por Holt-Harris y Teague. El uso de la eosina y del azul de metileno permite la diferenciación de las colonias fermentadorasde lactosa de las no fermentadoras. La sacarosa está incluida en el medio para detectar a los miembros del grupo coliforme que fermentan más rápidamente la sacarosa que la lactosa. Este medio se considera superior al Agar ENDO, ya que resulta ser un medio más sensible, estable y seguro y permite una diferenciación mas temprana entre las colonias fermentadoras y no fermentadoras de lactosa.Holt-Harris y Teague desarrollaron posteriormente la formulación para el Agar de Levine para la diferenciación de organismos coliformes fecales y no fecales. Este medio permite diferenciar al grupo Salmonella y otros organismos lactosa negativos de organismos coliformes. El Agar EMB es una combinación de la fórmula original y la de Levine donde las peptonas proveen la fuente de nitrógeno, la eosina y...