Microbiologia

PRÁCTICA NO. I; SESIÓN II:
“ESTERILIZACIÓN POR MÉTODOS FÍSICOS: CALOR SECO Y CALOR HÚMEDO”

I. INTRODUCCIÓN
En un laboratorio de microbiología se recurre a una gran variedad de métodos para efectuar la esterilización, dado que todo el material debe esterilizarse antes y después de su empleo para que se manipule adecuadamente y para preparar su uso posterior.

Antes de utilizar una técnica deesterilización, es necesario preparar el material para estos procesos para evitar que sufra daños o recontaminaciones. El material a esterilizar debe estar limpio y no manchado, enjuagado con agua destilada.

ESTERILIZACIÓN POR CALOR SECO
FLAMEADO
Se emplea para esterilizar objetos que no se deterioren por la acción intensa del calor, tales como el material de vidrio y las asas de platino onicromel.
B) HORNOS
En ellos se esteriliza el material por aire caliente a 160ºC por dos horas o 171ºC por una hora. Se suelen utilizar para esterilizar pipetas, placas de Petri de vidrio y algún otro material principalmente de vidrio.
ESTERILIZACIÓN POR CALOR HÚMEDO
Existen varios métodos: ebullición, vapor a presión, tindalización, etc. La técnica más utilizada es la de vapor a presión por medio dela autoclave.

II. OBJETIVOS (COMPETENCIAS A DESARROLLAR)

GENERALES:
* Que seamos capaces de preparar el material de acuerdo a los diferentes tipos de esterilización
* Que seamos capaces de utilizar los diferentes métodos de esterilización según los necesite.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

Que seamos capaces de:
* Preparar el material de vidrio para esterilización en autoclave
* Prepararel material de vidrio para esterilización en horno
* Esterilizar y utilizar el autoclave
* Esterilizar en horno
* Practicar la incineración del asa de nicromel y varilla de vidrio

III. MATERIAL.
PREPARACIÓN

POR EQUIPO | POR GRUPO |
Asa de nicromel con su porta asa | Agua Destilada |
Bote de lámina (cilindro metálico) para cajas de Petri | Alcohol etílico |
Bote de lámina (cilindrometálico) para pipetas | Algodón |
Cajas de petri de plástico (2) | Ampolletas de esporas |
Cajas de petri de vidrio (6) | Autoclaves con sus canastillas |
Clips (Traer de casa) | Cinta mastintape |
Encendedor (Traer de casa) | Cinta testigo |
Guantes de asbesto | Encendedor |
Lentes de seguridad | Estufa de incubación |
Marcador | Horno de secado |
Pipetas de 1 ml (2) | Mecheros Fisher|
Pipetas de 10 ml (10) | Papel aluminio |
Pipetas de 5 ml (6) | Papel estraza o kraft |
Regla (traer de casa) | Rollo de bolsas de polipapel |
Tijeras (traer de casa) | Rollo de gasa |
Todos los matraces earlenmayer | Rollos de plástico para esterilización |
Tubo de ensaye 16x150 mm. con tapón de rosca | |
Varilla de vidrio en L o S (varilla de Digrasky) | |
Vaso de precipitado de 250ml. | |

HORNO
1. Se conectó el horno a la conexión de luz
2. Se introdujo un termómetro y después de 30 minutos se checo si se había alcanzado la temperatura deseada (160°C)
3. Se introdujeron los cilindros metálicos con pipetas y las cajas de Petri.
4. Después de 2 horas se apagó el horno y se esperó unos cuantos minutos para poder sacar el material
NOTA: No se sacaron los materialesinmediatamente ya que si esto hubiera sido así entraría bruscamente una corriente de aire frio que sería capaz de romper el material.
AUTOCLAVE 1
1. Se cerró la llave de salida del agua girándola a favor de las manecillas del reloj.
2. Se llenó con agua destilada el autoclave hasta que quedo cubierta la rejilla que hay dentro. Hay un medidor de agua sobre la llave de salida del agua, lacolumna de agua llego hasta la marca roja.
3. Se conectó el autoclave a la corriente eléctrica
4. Se prendió el autoclave girando la perilla al máximo y un foco rojo se encendió, esto nos indicó que el autoclave estaba calentando el agua.
5. Se sacó la rejilla con los guantes de asbesto y se colocaron en ella los materiales a esterilizar que fueron previamente envueltos en papel Kraft o...