MICROBIOLOGIA

Manual de Práctica de Microbiología y Parasitología de los alimentos

PRÁCTICA DE LABORATORIO N° 02

MORFOLOGÍA BACTERIANA, FÚNGICA Y PARASITARIA

I. INTRODUCCION
Debido al pequeño tamaño de la mayoría de los microorganismos, se requiere
de un microscopio óptico, ya sea de campo claro o de campo oscuro para hacer la
descripción morfológica de éstos. El microscopio de uso más común es el de campoclaro, en el que la observación de células vivas es limitada debido a que las células son
incoloras y permiten el paso de una gran cantidad de luz.
La observación de frotis teñidos es más recomendable. El frotis se prepara
haciendo una extensión de los microorganismos sobre una superficie transparente, en
la cual se fijan y tiñen los microorganismos. De acuerdo al número de soluciones
colorantes ya los objetivos de estudio se pueden realizar diferentes tipos de tinciones
como son: simple, diferencial, negativa y selectiva.
Los frotis de cultivos líquidos se deberán fijar con alcohol para evitar residuos del
medio, que al quemarse darán interferencias en las observaciones y los de colonias de
medios sólidos se fijan generalmente con calor. Después de la fijación, los frotis son
teñidos condiferentes colorantes sintéticos derivados de anilina.
Los colorantes más utilizados son sales formadas por iones coloridos cargados
conocidos como cromóforos. Por ejemplo: Cloruro de Azul de metileno. Si el cromoforo
es un ion positivo el colorante es de tipo básico, pero si la carga es negativa será de tipo
ácido. La mayoría de las bacterias son teñidas por colorantes básicos, que permean lapared celular y se adhieren por enlaces iónicos débiles a moléculas con cargas
negativas de la célula bacteriana. La tinción de las bacterias con azul de metileno, es un
ejemplo de tinción simple que facilita la observación de forma, tamaño y arreglo de las
células.
Conocer la morfología de los macro y microorganismos que invaden y/o
contaminan los alimentos es esencial para el futuro nutricionista,ya que el objetivo no
es solo proporcionar una dieta balanceada, sino que también los alimentos
recomendados tengan las condiciones y características necesarias para considerarse
en alimento en buen estado.

II. OBJETIVOS
- Reconocer y relacionarse con el buen uso y manteniendo del microscopio.
- Observar y describir la morfología de bacterias existentes en alimentos de elaboración
casera o queutilizan bacterias para su elaboración.
- Observar y describir la morfología de hongos existentes en alimentos de elaboración
casera o que utilizan hongos para su elaboración.
- Observar y describir la morfología de parásitos que afectan a los humanos.
- Aplicar las técnicas de preparación de frotis, de fijación y coloración más utilizadas en
el estudio microscópico de alimentos.

Dra. Gaby MónicaFelipe Bravo

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III. MATERIALES Y MÉTODOS
ACTIVIDAD Nº 01: RECONOCIMIENTO Y MANIPULACIÓN DEL MICROSCOPIO
Señala las partes que se solicitan

ACTIVIDAD Nº 02: PREPARACIÓN DE FROTIS Y OBSERVACIÓN DE MUESTRAS MICROSCÓPICAS
Y MACROSCÓPICAS DE BACTERIAS Y HONGOS
a) PREPARACIÓN DE FROTIS:
1. Lavar perfectamente losportaobjetos, sacudir el agua, secarlos al mechero y
etiquetarlos o rotularlos.
2. Prender el mechero y esterilizar el asa en la flama del mechero hasta que se ponga
al rojo vivo.
3. Dejar enfriar el asa para evitar que al tomar la muestra los microorganismos sean
destruidos. En el caso de que la muestra se encuentre en un tubo de ensayo acercar al
mechero el tubo de cultivo, quitarle el tapón y flamearrápidamente la boca del mismo.
Introducir el asa en el tubo de cultivo y tomar cuidadosamente la muestra.
4. Para el caso de cultivos líquidos, colocar la muestra en el centro del portaobjetos,
extenderla suavemente en un área circular de 2 cm. de diámetro aproximadamente y
esterilizar nuevamente el asa. Dejar secar el frotis al aire o al mechero evitando
sobrecalentar.
5. Si el cultivo es de medio...