Microbiologia

PRACTICA N° 3 y 4
MORFOLOGIA BACTERIANA Y FUNDAMENTOS DE TINCION








PRESENTADO A:
Henry Jurado Gámez Zoot. Esp. M.Sc Ph.D

PRESENTADO POR:
De La Cruz Cadena Dania Astrid Código: 215071128
Pinchao Guerrero Ruth Mari Código: 215071317







UNIVERSIDAD DE NARIÑO
FACULTAD DE CIENCIAS PECUARIAS
ZOOTECNIA
SAN JUAN DE PASTO
17 DE SEPTIEMRE 2015
Resumen:
Los días 2 y 9 de septiembre se llevó acabo la realización de tinción de gram para determinar tamaño y morfología de los microorganismos, haciendo montajes de cultivos de bacterias, tincpión de estas para determinar el tipo de gram al que pertenecen ya sean positivos o negativos y su posterior visualización en el microscopio, para observar las características que estos poseen además de los movimientos que estos tienen.



Introducción:La tinción es un método importante para determinar los tipos de bacterias según la coloración que este obtenga, para estudiarlas y clasificarlas, además que se determina el tamaño y morfología de los organismos, aplicando una serie de colorantes que contienen radicales cromoforos ya sean ácidos, básicos y neutros. Los ácidos tiñen las células básicas, los básicos las partes celulares acidas.Dándose coloraciones simples, usando un solo colorante acido o básico y diferenciales que permite observar la estructura interna ya sea por tinción de Gram, coloración de capsula, coloración de espora, prueba de KOH y prueba de motilidad. Además de ello nos permite observar cualidades de las bacterias que no son visibles normalmente sin tinción en un microscopio, por ejemplo la coloración de capsula quenos permite ver las cualidades de la bacteria y su resistencia, además que con las otras tinciones podemos observar si es gram positivo o gram negativo lo que facilita el método de ataque o uso con estos debido a que con estos métodos se conoce las características de la pared de peptidoglucano.












Materiales:
Laminas portaobjetos
Laminas cubre objetos
Asa de inoculación
Mechero
GoteroCultivos de bacterias
Colorantes: azul de metileno, cristal violeta, fucsina, safranina, nigrosina o tinta china
Agua destilada estéril
Aceite de inmersión
Papel lente
Lugol de Gram
Alcohol acetona (decolorante)
Safranina o Fucsina (contracolor)
Cristal violeta 1% (solución acuosa)
Sulfato de cobre al 20% (solución acuosa)
Solución acuosa de verde de malaquita al 5%
Solución acuosa de safranina al0.5%
Cajas de Petri estériles
Papel filtro estéril
KOH al 3%
Palillos de madera estériles
Tubos con agua destilada
Métodos:
Preparación de extendidos
Se esterilizo una asa para bacterias en el mechero posteriormente se la enfrio introduciéndola en el agua destilada para tomar una gota limpia de esta, se colocó la gota en una lámina portaobjetos limpia, nuevamente se esterilizo la asa y se laenfrió en el borde del medio de cultivo de las cajas de Petri tomando una porción de colonia bacteriana que se extendió en el portaobjetos con agua con el fin de que queden bien esparcidas.
Coloraciones simples
Se colocó las laminillas con las que se preparó los extendidos sobre una bandeja de coloración, y se les agrego colorantes, usamos la Fucsina o safranina durante 30 sg, después se lavó laslaminillas con agua destilada, se escurrió y se dejó secar a temperatura ambiente para su observación en microscopio
Coloraciones diferenciales
Prueba de KOH
Se Agrega un agota de KOH En el portaobjetos con la aza de ojo Bien flameada dejándola enfriar se toma suficiente cantidad de cultivo dejar por 30 segundos y estiramos para así poder observar la característica de las Gram Negativas que es laCapa mucosa para poder visualizar bien esta.
Motilidad
En una gota de agua destilada con el portaobjetos y una aza preferiblemente de punta se esterilizo tomando cierta cantidad de cultivo de Escherichia Coli En Capsula Porque tiene flagelos. Se depositó sin extender cubierto por el cubreobjetos y observar resultados al microscopio. Recomendación para esto se usó tapabocas porque el...