Micronbio 2

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA
LA MOLINA

TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
Informe N°02
INTEGRANTES:
* 20101475 Condori, Gabriela
* 20080993 Diaz, Tania
* 20101481 Guanilo, Diego
* 20101502 Varas, Miguel
PROFESOR:
* Ramos, Roberto

FECHA DE INICIO: Jueves 13 de setiembre
FECHA DE ENTRAGA: Jueves 20 de setiembre

MESA: 01
2012
I. INTRODUCCION
Eltamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea. El modo más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes.
Si se desea simplemente aumentar el contraste de las células para la microscopía, son suficientes los procedimientosque usan un solo colorante llamado de tinción simple. Sin embargo, a menudo se utilizan métodos que no tiñen de igual modo todas las células, es el proceso denominado tinción diferencial. Uno muy usado en microbiología es la tinción Gram. Basándose en su reacción a la tinción Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos: grampositivas y gramnegativas. Esta tinción tiene gran importancia entaxonomía bacteriana ya que indica diferencias fundamentales de la pared celular de las distintas bacterias.
Mientras que las bacterias gramnegativas son constantes en su reacción, los microorganismos grampositivos pueden presentar respuestas variables en ciertas condiciones. Por ejemplo, los cultivos viejos de algunas bacterias grampositivas pierden la propiedad de retener el cristal violeta, yen consecuencia, se tiñen por la safranina apareciendo como gramnegativas. Análogo efecto se produce en ocasiones por cambio en el medio del organismo, o por ligeras modificaciones en la ejecución de la técnica. Por este motivo, es preciso atenerse, en la práctica, al procedimiento establecido.
El objetivo en la presente práctica fue:
* Demostrar a través de la técnica de tinción diferencialde Gram la existencia de dos grupos principales de bacterias.

II. MARCO TEORICO
2.1. Tinción diferencial
Se basa en el hecho de que distintos tipos de células tienen distinta composición química, y por lo tanto reaccionan de forma diferente frente a una tinción, lo que permite clasificar los microorganismos en diferentes grupos, según su capacidad de tinción. En este apartado están dostinciones de importancia taxonómica y médica: la tinción de Gram y la de ácido-alcohol resistencia (de Ziehl-Neelsen). Estas tinciones utilizan más de un colorante.
2.2. Fundamento de la tinción diferencial de Gram
Según Madigan (2009) las diferencias estructurales entre las paredes celulares de las bacterias gram positivas y las gram negativas son las responsables del diferente comportamiento delas células a la tinción de Gram en dicha tinción, se forma dentro de las células un complejo cristal insoluble violeta-yodo que en el caso de las Gram negativas puede extraerse con alcohol, pero no en las Gram positivas. El alcohol deshidrata las bacterias Gram positivas, que poseen paredes celulares muy gruesas con varias capas de peptidoglucano. Esto provoca el cierre de los poros de lasparedes impidiendo la salida del complejo cristal violeta-yodo. En las Bacterias Gram negativas, el alcohol penetra rápidamente en la capa externa que es rica en lípidos y la fina capa de peptidoglucano no impide el paso del solvente, por lo que el complejo se extrae fácilmente.
La técnica se basa en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas.
Lapared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en la superficie, el ácido teicoico que está anclado solamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína)
Por el contrario, la capa de...