Microobiologia
Páginas: 3 (714 palabras)
Publicado: 24 de abril de 2012
LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA GENERAL
Semana del 10 al 14 de Mayo
Práctica No. 6
MICROSCOPIA II PARTE
TINCION DE ESTRUCTURAS
RECUENTO DE MICROORGANISMOS:
CAMARA DE NEUBAUERTINCION DE ESTRUCTURAS
RECUENTO DE MICROORGANISMOS
CAMARA DE NEUBAUER
1. INTRODUCCION
El cálculo del número de células que existen en una suspensión se puede llevar a cabomediante el recuento celular (microscopía, número de colonias), masa celular (peso seco, medida del nitrógeno celular, turbidimetría) o actividad celular (grado de actividad bioquímica con relación altamaño de la población). Todos estos métodos se clasifican en dos apartados: métodos directos y métodos indirectos.
Métodos directos:
1. Recuento del número de células en una cámara
2. Peso secocelular
3. Determinación de nitrógeno o de proteínas totales
4. Determinación de DNA
Métodos indirectos:
• Recuento de colonias en placa
• Recuento sobre filtro de membrana
• Consumo deoxígeno
• Liberación de dióxido de carbono
• Concentración de un enzima constitutivo
• Decoloración de un colorante
• Incorporación de precursores radiactivos
• Medida de la turbidez
RECUENTOMICROSCÓPICO:
Es una técnica común, rápida y barata que utiliza un equipamiento fácilmente disponible en un laboratorio de microbiología. Para estos recuentos se utilizan generalmente cámaras derecuentos, aunque también pueden realizarse a partir de muestras filtradas en membranas y transparentizadas o teñidas con colorantes fluorescentes (Naranja de acridina).
La mayor dificultad delrecuento en cámara es obtener reproductibilidad en el llenado de la cámara con líquido. Otra dificultad es la adsorción de las células en las superficies del vidrio, incluyendo pipetas.
Estaadsorción es crítica en el proceso de dilución de la muestra y se minimiza al realizar las diluciones en medios de alta fuerza iónica (solución fisiológica o medios mínimos sin fuente de carbono)....
MICROBIOLOGIA GENERAL
Semana del 10 al 14 de Mayo
Práctica No. 6
MICROSCOPIA II PARTE
TINCION DE ESTRUCTURAS
RECUENTO DE MICROORGANISMOS:
CAMARA DE NEUBAUERTINCION DE ESTRUCTURAS
RECUENTO DE MICROORGANISMOS
CAMARA DE NEUBAUER
1. INTRODUCCION
El cálculo del número de células que existen en una suspensión se puede llevar a cabomediante el recuento celular (microscopía, número de colonias), masa celular (peso seco, medida del nitrógeno celular, turbidimetría) o actividad celular (grado de actividad bioquímica con relación altamaño de la población). Todos estos métodos se clasifican en dos apartados: métodos directos y métodos indirectos.
Métodos directos:
1. Recuento del número de células en una cámara
2. Peso secocelular
3. Determinación de nitrógeno o de proteínas totales
4. Determinación de DNA
Métodos indirectos:
• Recuento de colonias en placa
• Recuento sobre filtro de membrana
• Consumo deoxígeno
• Liberación de dióxido de carbono
• Concentración de un enzima constitutivo
• Decoloración de un colorante
• Incorporación de precursores radiactivos
• Medida de la turbidez
RECUENTOMICROSCÓPICO:
Es una técnica común, rápida y barata que utiliza un equipamiento fácilmente disponible en un laboratorio de microbiología. Para estos recuentos se utilizan generalmente cámaras derecuentos, aunque también pueden realizarse a partir de muestras filtradas en membranas y transparentizadas o teñidas con colorantes fluorescentes (Naranja de acridina).
La mayor dificultad delrecuento en cámara es obtener reproductibilidad en el llenado de la cámara con líquido. Otra dificultad es la adsorción de las células en las superficies del vidrio, incluyendo pipetas.
Estaadsorción es crítica en el proceso de dilución de la muestra y se minimiza al realizar las diluciones en medios de alta fuerza iónica (solución fisiológica o medios mínimos sin fuente de carbono)....
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