Microobiologia

BENEMERITA UNIVERSIDAD AUTONOMA DEPUEBLA
FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA
COLEGIO INGENIERIA EN ALIMENTOS
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO PRACTICA 1
EQUIPO 1

INTRODUCCIÓN.
Los medios de cultivo deben contener los elementos nutritivos necesarios para permitir la multiplicación de las bacterias inicialmente pueden clasificarse en dos grupos líquidos y sólidos.(Prast, G. (2005), Microbiología Medica, Medica Panamericana S. A., 1ra edición, Buenos Aires; Madrid, pp. 24.) El tipo de medio que utiliza un microbiólogo depende del microorganismo que esta cultivando y el por qué de dicho cultivo. Los microorganismos presentan enorme variedad de requerimientos nutricionales. Se utiliza un medio mínimo para determinar los requerimientos nutricionales de unorganismo y un medio rico si se desea obtener masa celular de una forma rápido. Los medios se pueden formular para el desarrollo de una especie o para distinguir entre especies o cepas. Por tanto los medios se clasifican en definidos, complejos o indefinidos, selectivos, diferenciales y de enriquecimiento, dependiendo de su composición y uso (Ingraham, J.L, Schaechter,M. (2004) Introducción a laMicrobiología, Reverté, S.A., 2da edición, España, pp. 67,68).
OBJETIVO.
Conocer el procedimiento para la preparación de los medios de cultivo, para el aislamiento e identificación de microorganismos así como su correcto preparamiento y esterilización que proporcionan las condiciones ideales para el desarrollo de los microorganismos.
MATERIALES Y MÉTODOS.
En cada medio de cultivo nos indicó a laforma en la que se debe de preparar, aunque en la mayoría de los casos se usan las siguientes indicaciones.
1.- Utilizar un matraz con un volumen mayor al que se prepara.
2.- Al medio se le agrega aproximadamente la mitad del agua total a utilizar dejándola reposar unos minutos.
3.- Si es necesario calentar este debe de ser paulatino y agitando paulatinamente (ver figura 3, 4, 5) (evitar elcalentamiento prolongado).
4.- Se vierte en placas petri, se dejan reposar hasta que gelen.

Los métodos para la esterilización de los medios se llevara a cabo por la autoclave (Fig. 1) y el procedimiento será.
FIG.1 Una autoclave u-tiliza vapor de agua a presión para esterilizar o-bjetos me-diante calor.

a) Meter a la autoclave durante 15 min. A 121 oC (15 lbs).
FIG.2 Indicador de lapresión dentro de la autoclave.
b) Deben incluirse controladores de autoclave (Fig. 2)

c) Introducir en la autoclave ingredientes termolábiles.
La preparación de cada medio de cultivo viene indicada en el empaque del agar.
PDA: suspender 29 gr de polvo en un litro de agua purificada, mezclar perfectamente y calentar con agitación frecuente (ver Fig. 3)
Agar nutritivo: suspender 23gr de polvoen un litro de agua purificada, mezclar perfectamente y hervir durante uno a dos minutos (ver Fig. 4)
Agar Mc conkey: suspender 50gr del medio en un litro de agua purificada, dejar reposar de 10 a 15 min y calentar, dejando hervir durante un minuto (ver Fig. 5)
Base de caldo tetrationato: suspender 46gr del polvo en un litro de agua purificada y calentar hasta la ebullición. Si se va a usar elmismo día agregar 20ml de solución yodo-yodurada si no es así agregar hasta el día de empleo.
Agar verde brillante: suspender 58 gr, mezclar y calentar, agitando frecuentemente.
Nota: todos los agares se dejan en la autoclave con las mismas temperaturas y presiones previamente indicadas.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN.
Fig. 3 agar PDA al ser calentado y agitado.

Agar PDA
* Es un medioselectivo que principalmente se utiliza para el cultivo de microorganismos de de tipo hongo y levadura a partir de muestras de alimentos.
Tabla 1. composición del agar PDA |
AGAR PAPA DEXTROSA |
Infusión de papa | 4.0 gr |
Dextrosa | 20.0 gr |
Agar | 15.0 gr |
Agar nutritivo
Tabla 2, composición del agar nutritivo |
AGAR NUTRITIVO |
Peptona de gelatina | 5.0 gr |
Extracto de carne...