Microorganismos

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MICROORGANISMOS : INTERÉS BIOLÓGICO Y MÉTODOS DE ESTUDIO

I. EL ESTUDIO DE LOS MICROORGANISMOS El estudio de los microorganismos requiere la utilización de una serie de técnicas que permitan su aislamiento y su crecimiento bajo condiciones controladas. A continuación vamos a hacer un breve repaso de las principales técnicas que se emplean en el estudio de los microorganismos. A. CULTIVOSMICROBIANOS 1. Aislamiento de microorganismos Frecuentemente se requiere obtener cultivos constituidos por una única especie de microorganismo para su estudio. Estos cultivos se denominan cultivos puros y está formado por células provenientes de una sola inicial y por tanto pertenecientes a la misma especie y cepa. Se trata de una situación artificial ya que en la Naturaleza los microorganismos seencuentran formando poblaciones mixtas y heterogéneas. Sin embargo, se trata de un artificio obligado para estudiar cada especie y cepa de microorganismo en particular. Existen diversos métodos para aislar cultivos puros, entre ellos podemos destacar: - Técnica de siembra por estrías en placa. - Técnica de siembra por agotamiento de asa. - Técnica de enriquecimiento del cultivo: consiste endiseñar condiciones de cultivo que favorezcan específicamente al microorganismo que queremos aislar y que se encuentra en pequeñas cantidades. - Técnica de las diluciones en serie: se utiliza para microorganismos cuya proporción es mayoritaria dentro de la población mixta. - Técnica de aislamiento directo de una sola célula mediante un micromanipulador. 2. Medios de cultivo Un medio de cultivo consisteen una mezcla equilibrada de agua y los nutrientes necesarios para lograr el crecimiento de un microorganismos. Según su estado podemos distinguir: medios líquidos ; medios sólidos , que llevan un agente solidificante (Agar) que es un polisacárido producido por ciertas algas rojas que adquiere una consistencia gelatinosa por debajo de 45°C; medios semisólidos , que contienen también agar pero enuna concentración m enor. Por su composición, podemos distinguir medios: los medios sintéticos o químicamente definidos, de los cuales se conoce la composición exacta; medios complejos o de composición indefinida; los medios de enriquecimiento son medios complejos con aditivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados microorganismos; los medios selectivos , que son aquellos quefavorecen por su diseño el crecimiento específico de un microorganismo particular (o grupo de microorganismos); etc. 3. Métodos de cultivo Debido a su pequeño tamaño y a su ubicuidad, los microorganismos que se encuentran en el aire, en las manos o en el material de laboratorio pueden contaminar fácilmente los medios de cultivo. Para evitar la contaminación de los medios y materiales de cultivo pormicroorganismos no deseados se emplean las siguientes técnicas asépticas: - Los medios de cultivo y el material utilizado en su manipulación deben esterilizarse. Las técnicas de esterilización se estudian más adelante. - La manipulación de los cultivos se debe llevar a cabo en condiciones asépticas. Cuando los cultivos se destapan y manipulan, es muy importante evitar la entrada de aire y elcontacto con elementos que puedan estar contaminados. Por esta razón, la transferencia de un medio a otro se realiza siempre en la proximidad de la llama de un mechero, con un asa de cultivo o con una aguja de siembra. En la actualidad se utilizan campanas de siembra, compartimentos protegidos total o parcialmente por un cristal, donde se coloca la fuente de calor, que pueden incorporar extractores deaire o lámparas especiales que mantienen las condiciones asépticas. - Los microorganismos se “incuban” en una estufa, en las condiciones de temperatura, humedad, pH, etc., más adecuadas para su crecimiento, habitualmente entre 24 y 48 horas. Los microorganismos anaerobios se incuban en cámaras especiales libres de oxígeno. 4. Curva de crecimiento de un cultivo La mayoría de los cultivos...