Micropropagación de plantas

Micro-propagación de plantas
Introducción

Una de las herramientas básicas en el desarrollo de la biotecnología en plantas es la micropropagación, llamada también clonación. La finalidad de esta técnica consiste en generar clones plantas idénticas genéticamente) a partir de hojas o partes de la planta, con esto es fácil la manipulación de un tejido o un grupo de células, de las cuales podemosobtener la planta, permitiendo la reproducción de mejores ejemplares.
La micropropagación es una multiplicación masiva de tejidos in Vitro a partir de diferentes porciones o explantes extraídos de tejidos u órganos mediante métodos asépticos. Esta técnica se ha utilizado con éxito en especies hortícolas, ornamentales y leñosas, comprobando así las ventajas sobre otros sistemas convencionales,algunos de los más importantes son:
Incremento acelerado del número de plantas derivadas por genotipo
Reducción del tiempo de multiplicación
Posibilidad de multiplicar grandes cantidades de plantas en una superficie reducida, a bajo costo y con tiempos económicamente costeables.
Mayor control sobre la sanidad del material que se propaga
Facilidad para transportar el material in Vitro de un país a otrocon menos restricciones aduaneras.
Posibilidad de multiplica rápidamente una variedad de la cual solo existían pocos individuos.
Fases de la micropropagación
Elección de planta donante
La planta madre debe tener las siguientes características:
Saludable (libre de virus)
Resistente
Crecimiento activo
Fácil de manipular
Fácil de esterilizar
La elección de la planta y explante dependerá de lascaracterísticas que se esté buscando conservar en las plantas que se micropropagarán.
Los explantes que se tomarán pueden tener una longitud de 2 a 6 centímetros y se debe respetar la polaridad de éste, es decir, la orientación que tenía el explante en la planta madre.
Adaptación Aséptica
El objetivo de esta etapa es esterilizar el material con el que se trabajará para que esté libre demicroorganismos. El explante se puede tratar con agentes antimicrobianos, agentes antimicóticos, etanol, hipoclorito de sodio (cloro) y generalmente se enjuaga con agua destilada. Como se mencionó en la etapa 0, se busca que el explante sea resistente para que sobreviva a esta etapa.
Multiplicación In Vitro
Durante esta fase se espera observar brotes, los cuales sobrevivieron a la fase anterior.Periódicamente estos brotes se tienen que subcultivar en un nuevo medio para aumentar el número de plantas.
Enraizamiento
Durante esta etapa se forman raíces adventicias. Depende de cada  especie el tipo de enraizamiento y la facilidad con la que esta etapa se logre, por ejemplo para las especies herbáceas es mucho más fácil formar raíces que para las especies leñosas.
Adaptación al suelo
Finalmente, se lleva acabo la última etapa de la micropropagación, la adaptación al suelo no estéril. 
Esta fase se considera como crítica, pues hay muchas probabilidades de que la planta muera por no estar bien acondicionada.
Materiales y métodos

Agua destilada estéril
Agar o gelatina sin sabor
Sacarosa o azúcar mascabada
Etanol al 70% ( se prepara con 30 ml de agua destilada con 70 ml de Etanol)
Etanol al 10% ( seprepara con 90 ml de agua destilada con 10 ml de Etanol)
Hipoclorito de Sodio ( cloro ) al 2.5 % (se prepara con 50 ml de hipoclorito con 50 ml de agua destilada, con gotas de detergente doméstico)
Jabón desinfectante
Guantes quirúrgicos
Caja de Petri
Bisturí
Pinzas mecánicas
Papel aluminio
Frascos de Gerber (con tapa)
Vasos precipitados
Nutriente líquido para plantas
Algodón
Olla a presiónMetodología
Esterilizacióndematerial
Lave con abundante agua los jarros de vidrio, la caja de Petri y la pinzas, luego cubra la pinza con papel aluminio e inserte el material dentro de una olla a presión con una pequeña cantidad de agua, ponga a hervir por 25 minutos

Elaboración de soluciones

Solución de etanol al 70%
Tome una botella limpia, agregue 300 ml de agua destilada y 700 ml de etanol puro,...