micropropagacion

Micropropagación
El cultivo de tejidos puede definirse como el crecimiento estéril de células o tejidos de plantas, separados de la planta madre, en medios de cultivo artificiales in vitro (Guerra y Costa, 1988). El cultivo de tejidos es una herramienta importante en el estudio del metabolismo de las plantas, su genética, morfogénesis y 8 fisiología, en la transformación genética de plantas,eliminación de patógenos, en la preservación de especies de importancia en espacios limitados, y en la multiplicación de tejidos vegetales in vitro (Boxus, 1988). Los sistemas convencionales de propagación de la higuera han sido utilizados eficientemente, generando buenos resultados. Sin embargo estos presentan varias limitantes. Una de las principales es la incapacidad de realizar multiplicacionesmasivas en corto tiempo, ya que cada estaca o acodo regenerará una única planta, además sólo se pueden realizar cuando los árboles se encuentran en etapa vegetativa (Alvarenga, Abdelnour y Flores, 1996).
Con el desarrollo de las técnicas de micropropagación de plantas, se ampliaron las perspectivas de obtención de material con mejor calidad agronómica y en cualquier época del año, en un tiempo yespacio reducidos, y con el máximo aprovechamiento del propágulo vegetal (Alberti et al., 1992). Actualmente, con las técnicas de cultivo de tejidos, es posible obtener grandes cantidades de material clonal, en corto tiempo y con un mayor control sanitario, lo que a su vez facilita el transporte de material dentro y fuera del país de origen. Además es posible multiplicar variedades de las cualesexisten pocos individuos.
Para el desarrollo de esta técnica, deben considerarse ciertos aspectos fundamentales, como la procedencia, selección y desinfección del explante, la composición de los medios de cultivo.
Definición del problema
Tradicionalmente, la higuera es propagada masivamente en países como España, Turquía, Portugal y Brasil, donde miles de hectáreas son destinadas al cultivo deesta planta (Krezdorn y Adriance, 1984). Los acodos aéreos y el enraizamiento de estacas, han sido los métodos más utilizados para su propagación. A pesar de que estos sistemas han demostrado ser eficientes, no cumplen con las exigencias del mercado, las cuales son cada vez mayores. Las técnicas biotecnológicas como la micropropagación, han permitido la obtención de grandes volúmenes de plantas, enmenor tiempo y espacio, además de lograr una buena calidad fitosanitaria (Alberti et al., 1992).
Con la adopción e implementación de la 9 micropropagación, es que se facilita el intercambio de material y su comercialización a nivel nacional e internacional. No obstante, la información disponible a nivel mundial sobre el establecimiento in vitro del higo y su multiplicación es escasa. Por estarazón se propone realizar esta investigación.
En el Centro de Investigación en Biotecnología (CIB) se han realizado ensayos preliminares, tratando de evaluar el potencial de esta técnica en higo. Los resultados para las etapas de introducción y establecimiento in vitro han sido prometedores por lo que se quiere continuar con el resto de las etapas (micropropagación, enraizamiento, aclimatación yestablecimiento de material en campo).


Establecimiento in vitro
Preparación y desinfección de los explantes
Las estacas se sometieron a un lavado a mano, una a una, con agua y jabón líquido. Luego se sumergieron en una solución desinfectante que consistió en una mezcla de 6g/L Benlate, 6g/L Agri-mycim y 3.5g/L Ferbán por un período de 75 minutos.
Posteriormente se realizaron tres enjuaguescon agua destilada estéril y luego una desinfección con Hipoclorito de Calcio al 3.5% por un período de 10 minutos en la cámara de flujo laminar.
Se realizaron nuevamente tres enjuagues con agua destilada estéril y los explantes se mantuvieron en una solución de ácido ascórbico (600mg/L), con el fin de evitar la oxidación del material.
Inoculación del material
Debido a que en pruebas...