Micropropagación

Micropropagación de Zingiber rubens y la evaluación de la estabilidad genética mediante marcadores RAPD e ISSR
abstracto
Protocolo fue elaborado por alta frecuencia en la multiplicación in vitro de una especie endémica, Zingiber rubens Roxb. la
brotes germinados de los rizomas se cultivaron en medio de Murashige y Skoog (MS) complementado con
6-benciladenina (BA; 0,5 a 5,0 mg dm-3),indol-3-acético (IAA; 0,5 -2,0 mg dm-3), quinetina (KIN; 1,0 a 3,0 mg dm-3),
naftalenacético (NAA, 0,5 - 1,0 mg dm-3) y sulfato de adenina (ADS, 80 - 100 mg dm-3). MS basal mediano
suplementado con 3 mg dm-3 BA y 0,5 mg dm-3 IAA era óptimo para la elongación del tallo. Los brotes alargados
(1 - 2 cm) se transfirieron a un medio de crecimiento que contenía 2 mg dm-3 BA, 1 mg dm-3 IAA y ADS 100 mg dm-3.La tasa de multiplicación se mantuvo sin cambios en los subcultivos posteriores. Tras la transferencia ex vitro, 85% de las plantas sobrevivieron.
Estabilidad genética de los clones micropropagadas fueron evaluados periódicamente en un intervalo de 6 meses y hasta 30 meses en
cultivo utilizando al azar de ADN polimórfico (RAPD) y repita el inter secuencia simple (ISSR) análisis y
uniformidadgenética en todos los regenerantes fue confirmado.
ntroducción
Red jengibre (Zingiber rubens Roxb.) Es una especie endémica
especies de la familia Zingiberaceae (Jain y Prakash 1994)
restringido al noreste de la India y el Himalaya oriental.
La planta se utiliza como ornamental o para fines medicinales
propósitos. La planta se propaga lentamente produciendo
máximo de 8 plantas por rizoma enun año en el campo.
El carácter endémico y la velocidad lenta propagación natural
insiste en que su conservación y propagación a través del tejido
cultura técnica. En la técnica in vitro puede ser utilizado en
propagación y conservación de especies endémicas ya sea a
producir nuevas plantas o plazo como intermedio o largo
del sistema de almacenamiento (Muñoz 1995). Regeneración de plantas invitro y reintroducción en hábitats naturales es una estrategia para
conservación de las especies vegetales importantes (Rout y Das
2002).
El seguimiento periódico del grado de estabilidad genética
de plantas in vitro conservados es de suma importancia para
utilización comercial de los fieles a las plantas de tipo de la
genotipo deseado. La evaluación de la integridad genética
deregenerantes cultivadas in vitro en intervalos regulares puede
reducir significativamente o eliminar la probabilidad de ocurrencia
de la variación somaclonal (Larkins y Scowcroft 1981) en
la fase temprana o tardía de cultura. De los varios
marcadores moleculares de ADN polimórfico amplificado al azar
(RAPD) y la inter simple secuencia se repite (ISSR)
análisis son el método más simple y rápido paragenética
evaluación de la estabilidad de las plantas in vitro cultivados. In vitro
cultivo se ha informado de muchas especies de género
Zingiber, es decir, Z. officinale (Bhagyalakshmi y Singh
1988, Balachandran et al. 1990, Kacker et al. 1993,
Sharma y Singh 1997, Rout y Das 2002, Mohanty
et al. 2008), Z. Cassumunar (Poonasapaya y Kraisintu
1993), Z. petiolatum (Chang y Criley 1993),
Z.spectabile (Faria y Illg 1995), Z. wighitianum
Z. montanum, y Z. zerumbet (Tyagi et al .. 2006). En la
presente trabajo se reporta la micropropagación in vitro
conservación y la estabilidad genética de in vitro regenerado
plántulas de etnobotánica importante Zingiber rubens.

Materiales y Metodos

Rizomas de Zingiber rubens Saludables Roxb. coleccionado
de Kalimpong, West Bengal, India síplantaron en el Suelo
Para iniciar la germinación. Los rizomas germinados were LUEGO
removida del Suelo y SE LAVO bien con Agua del grifo.
Piezas de rizomas contienen Brotes sí lavaron
A Fondo con Agua Seguido De Un detergente LÍQUIDO
(Extran, Merck, Mumbai, India) Durante 10 Minutos y de Nuevo
con Agua esterilizada. Estós were esterilizadas en superficie
con 0,1% (m / v) de Cloruro...