MICROSCOPIA ELECTRONICA
VISUALIZACIÓN DE VIRUS POR MEDIO DE MICROSCOPIA ELECTRONICA
INTRODUCCIÓN
Los métodos utilizados para reconocer las infecciones por virus en plantas pueden clasificarseen DIRECTOS e INDIRECTOS, según persigan demostrar la presencia del virus o de alguno de sus constituyentes o bien la respuesta de anticuerpos específicos por parte del huésped en el curso de la infección.Para diagnosticar estos eventos debemos tener en cuenta que la microscopía electrónica es una técnica que requiere un instrumento de alta complejidad y personal altamente especializado. Se utilizan lamicroscopía electrónica de transmisión o convencional y la de barrido (Chuaqui, 1998).
Las muestras para microscopía electrónica deben fijarse en glutaraldehído. Los fragmentos deben ser pequeños ytienen que fijarse en forma de varios trocitos cuboideos de tejido de no más de 1 mm, obtenidos con hoja de afeitar o bisturí limpios. Las muestras se incluyen en resinas sinteticas (Epon) y sepractican cortes 10 veces más delgados que los de microscopía de luz llamados cortes ultrafinos. La tinción se realiza con sales de metales pesados como citrato de plomo, tetróxido de Osmio o acetato deuranilo, que permiten un contraste adecuado del tejido bajo el haz de electrones. Los cortes ultra-finos se montan sobre grillas de cobre, se tiñen y se observan al microscopio electrónico (Martínez,2011).
El objetivo de la práctica fue realizar la visualización de un virus para su posterior identificación, utilizando el microscopio electrónico de la Universidad Nacional de Colombia.
OBJETIVOSEntender y comprender como se maneja el microscopio electrónico en la observación de una muestra.
Realizar la observación de una partícula viral.
Realizar la identificación posible del virusobjeto de estudio.
MATERIALES
Microscopio electrónico, muestra vegetal, Buffer fosfato (pH=7,0), mortero, rejillas de cobre, Acetato de uracilo, parafina, caja petri.
METODOLOGIA
La...
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