Microscopia Ii

UNIVERSIDAD ANDRÉS BELLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR
SECCIÓN BIO-131-1

Informe de Laboratorio de Biología Celular Nro.3

MICROSCOPIA EL AVANCE A LA BIOLOGIA CELULAR II

Integrantes:
* Constanza Aracena
* Fabián Vallejos
* Rocío Vilches
Profesores:
* Cinthya Ruiz-Tagle Seguel
* Patricio PonceBusto

Carrera: Medicina
Sección: 1
Fecha de entrega: 2 de Mayo 2012

Introducción

El descubrir que con la microscopia podíamos soslayar algunas de las limitaciones del ojo humano y visualizar estructuras que normalmente son invisibles dada su pequeñez fue solo el comienzo de esta disciplina que abría un campo insospechado a la ciencia.
La microscopía empleaba lentes que al refractar laluz permitían enfocar y formar imágenes mucho más grandes de estructuras invisibles por su pequeñez, sin embargo aún había dificultades para poder visualizar elementos biológicos transparentes y sin pigmentar, invisibles con iluminación normal. Es así como se crea otra forma para poder visualizar estos elementos a través da la microscopía de campo oscuro (7)que utilizando un haz de luz muyintensa enfocado en forma de un cono hueco concentrado sobre la muestra, hace que el objeto iluminado disperse la luz y se hace así visible contra el fondo oscuro que tiene detrás. La luz dispersa permite incluso distinguir partículas más pequeñas que el poder separador del sistema óptico usado por transparencia. Por otra parte no basta ver, también se hace necesario contar numéricamente estaspequeñas estructuras .La Cámara de Neubauer (8) es un instrumento utilizado en medicina y biología para realizar el recuento de células en un medio líquido, que puede ser un cultivo celular, sangre, orina, líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial, etc. Esta cámara de contaje está adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Con base en la cantidad de células contadas, conociendoel volumen de líquido que admite el campo del retículo, se calcula la concentración de células por unidad de volumen de la muestra líquida inicial. Podemos así comparar la concentración de células en un líquido en diferentes situaciones de normalidad (por ejemplo a diferentes edades, a diferente altura sobre el nivel del mar, o en una situación fisiológica diferente como es el embarazo, etc.) y asu vez que sucede con esta concentración en casos de enfermedad.

Objetivo Principal

- Generar un campo oscuro para la observación de muestras de sangre
- Aprender utilización de cámara de Neubauer para recuento de glóbulos rojos.
- Determinar el tamaño celular en un frotis sanguíneo.

Actividad 1 – Campo oscuro
Procedimiento:
a) Observar frotis de sangre con microscopio de campoclaro normal a 4X, 10X y 40X.
b) Colocar círculo negro sobre la fuente de luz en la parte inferior del microscopio, dejando pasar la luz por los bordes del círculo y observar frotis de sangre a 4X, 10X y 40X.

1ra Muestra – Campo claro
Nombre: Frotis de Sangre
Tinción: tinción de Giemsa
Observaciones: Se pueden observar elementos figurados, como eritrocitos y un linfocito (glóbuloblanco) (3).
Aumento objetivo: 40X / 0.65
Aumento total: (10X) (40X) = 400X
Tipo de muestra: Permanente

2da Muestra- Campo oscuro
Nombre: Frotis de sangre
Tinción: tinción de Giemsa
Observaciones: mismos elementos figurados con la diferencia que sus bordes se ven luminosos, con lo que resalta más la forma de los eritrocitos y glóbulos blancos. (4)
Aumento objetivo: 40X / 0.65
Aumentototal: (10X) (40X) = 400X
Tipo de muestra: permanente

* ¿Cuál es la diferencia, en la observación, entre el microscopio de campo claro y el de campo oscuro? Explique.
La diferencia entre ambos campos es que en el de campo claro se pueden observar las células con sus respectivos organelos, en cambio en el del campo oscuro solo se puede apreciar la forma de las células, debido que el haz de...