Microscopia

LABORATORIO BIOLOGÍA CELULAR
INTRODUCCION La biología es un área muy rica visualmente. Sin embargo muchas de las estructuras y eventos biológicos más interesantes son más pequeñas de lo que el ojo humano puede ver sin ayuda. En realidad el ojo humano tiene una resolución de cerca de 100 µm. Para observar muestras biológicas no visibles para la resolución humana, se utilizan microscopios.Existen diferentes tipos de microscopios.
El Microscopio óptico El microscopio óptico tiene un limite resolución de cerca de 200 nm (0.2 µm). Este limite se debe a la longitud de onda de la luz (0.4-0.7 µm). Las células observadas bajo el microscopio óptico pueden estar vivas o fijadas y teñidas.
El Microscopio Electrónico de Transmisión (MET) El microscopio electrónico de transmisión (MET)tiene un límite de resolución de cerca de 2 nm. Esto es debido a limitaciones del lente usado para enfocar electrones hacia la muestra. Un MET mira a replicas de células muertas, después de haber sido fijadas y teñidas con iones de metales pesados. Los electrones son dispersados cuando pasan a través de una fina sección del espécimen, y luego detectados y proyectados hacia una imagen sobre unapantalla fluorescente.
El Microscopio Electrónico de Barrido (MEB) El microscopio electrónico de barrido (MEB) también tiene un límite de 2nm. Al igual que el MET, el MEB permite mirar a células muertas, después de haber sido fijadas y teñidas con iones de metales pesados. Con esta técnica los electrones son reflectados sobre la superficie del espécimen.
Cuando use un microscopio, tenga en mentelas siguientes consideraciones:
• Al transportar el microscopio, siempre tómelo del brazo. Sosténgalo verticalmente y apoye la base sobre su mano libre.
• El brazo sostiene un tubo inclinado que a su vez sostiene los elementos magnificadores del microscopio. Al final del tubo está el ocular, uno de estos elementos. Los otros elemento de magnificación están atornillados en una pieza alfinal del tubo, estos se llaman objetivos.
• Bajo el tubo inclinado y los objetivos, hay una placa plana, la plataforma, sobre la cual se posicionan los elementos que serán observados. Directamente bajo la abertura de la plataforma, hay un sistema de lentes, el condensador, que sirve para concentrar la luz desde la fuente de iluminación de más abajo.
• La luz juega un papel muy importanteen la operación de un microscopio compuesto. Esta debe ser ajustada adecuadamente, para lo que existen varios controles. El diafragma se puede ver debajo del sistema condensador.
• Los cambios y ajustes de foco, necesarios cuando un objeto se pone sobre la plataforma para su observación, se realizan con las perillas de ajuste grueso y fino (macro y micrométricos).
Realice un esquema de unmicroscopio compuesto y reconozca los elementos de las palabras resaltadas en el texto superior.
Tipos de muestras y preparación de muestras.
Placas preparadas: Organismos completos o secciones (cortes finos) de órganos o tejidos. En el caso de material seccionado, un órgano o una pieza de tejido se matan y se fija en un material preservante para luego ser infiltrado y embebido en parafina oplástico. El bloque resultante se corta en secciones finas (normalmente 4 - 10mm de grosor) sobre un micrótomo y las secciones se montan sobre una placa de vidrio (porta-objeto).La parafina es removida y el material teñido con técnicas especiales para resaltar alguna estructura o sustancia. Finalmente, la preparación se cubre con un cubre-objeto.
Muestras frescas: estas pueden ser de organismoscompletos, cortes finos con hojas de afeitar de parte o todo un organismo, o de material que es mecánicamente o químicamente aislado. El material se pone sobre una gota de suero salino o agua en el centro del porta-.objetos. Se debe tener cuidado de no dejar burbujas de aire cuando se ubique el cubre-objeto. Hay que evitar que la muestra se seque, dejando caer una gota de suero salino o agua cada...