Microscopia

Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Química

Microscopía

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1. Microscopia
El estudio detallado de los componentes de células y tejidos animales o vegetales,
por el tamaño que poseen, requiere el uso de instrumentos que permitan ampliar
muchas veces más la imagen de las estructuras que los constituyen. [1]
a) Fundamentos
El instrumento que fue empleado porlos primeros biólogos para estudiar la célula y
los tejidos, es el microscopio. El nombre deriva etimológicamente de dos raíces
griegas: mikrós, que significa pequeño y skopéoo, que significa observar. Es decir
el microscopio es un instrumento que sirve para observar objetos o estructuras
pequeñas. [1]
Partes de un microscopio. (Figura 1)

Figura 1: Microscopio completo. El tubo y elcondensador pueden moverse por
separado a lo largo de un eje óptico para el enfoque. [2]
a) Aplicación
Los bioquímicos y los biólogos moleculares olvidan muy a menudo que los sistemas
físicos y químicos, así como las moléculas y macromoléculas estudiadas, están
ubicadas en las células. No solamente vale la pena y es satisfactorio observar las
células por sí mismas, sino que la observación con elmicroscopio puede
proporcionar información cuantitativa, especialmente cuando se utilizan técnicas tan
importantes como las de polarización, interferencia y microscopia de fluorescencia.
[3]

Durante el paso del tiempo el microscopio ha sufrido grandes avances, a finales del
siglo XIX fue que los adelantos en el desarrollo de los lentes y de las técnicas para
tratar el material de estudiodio un paso enorme, a tal punto que los instrumentos y
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técnicas aplicadas en esos tiempos son muy similares a las empleadas en la
actualidad.
Las aplicaciones generales del microscopio son la observación, con la cual se
pueden examinar, describir y comparar sistemas microscópicos. También se utiliza
como instrumento de representación gráfica, fotográfica y 3D.
b) Poder deresolución.
Es la capacidad de las lentes de distinguir o resolver (mostrar separados) con nitidez
dos puntos situados muy próximos entre sí. Se expresa como la distancia mínima
que permite dar una imagen bien definida de dos puntos, en vez de verlos como
uno solo. Cuanto mayor es el poder de resolución (PR), menor es la distancia que
separa los puntos entre sí sin que estos se confundan. Enconsecuencia, cuanto
mayor sea el poder resolutivo del objetivo, más finos serán los detalles de la
preparación que puedan distinguirse. Puede determinarse en base a la longitud de
onda de la luz utilizada (λ) y directamente proporcional a la apertura numérica (AN)
El valor de AN varía con cada objetivo y está inscripto con números decimales
pequeños en cada uno de ellos. El PR se puedeestimar indirectamente calculando
el “limite de resolución”. [4] (Figura 2)

Figura 2: A. Representación gráfica de la intensidad de la luz que rodea a una fuente
de luz de diámetro d. La imagen es una mancha central brillante rodeada por anillos
brillantes, cuya configuración se denomina disco de Airy. A medida que d es más
pequeño, x aumenta. El tamaño de la región central es el principalresponsable de
la poca resolución entre dos puntos luminosos muy cercanos. A medida que λ
disminuye, x disminuye, de forma que se puede aumentar la resolución
disminuyendo la longitud de onda. B. Ilustración del ángulo. C. Resolución de dos
objetos puntuales. [5]

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2. Microscopio fotónico
Hay dos tipos de microscopios fotónicos, el primero, microscopio simple o de lupafunciona amplificando la imagen por medio de una o más lentes convergentes en
un solo sistema óptico. Este microscopio puede ampliar desde 5, 8, 10, 12, 20 y
hasta 50 veces la imagen.
El segundo microscopio es el fotónico compuesto recibe su nombre porque la
imagen se forma mediante la utilización de 3 sistemas de lentes, cada uno de ellos
constituidos por lentes convergentes y divergentes. […]...