Microscopio Confocal

Microscopio Confocal:
Historia: Aunque el principio de la microscopía confocal fue dado a conocer por Minsk en 1957 y los primeros microscopios basados en esta técnica demostraron su validez en1968, gracias a los trabajos de Petran y colaboradores; su gran aceptación tuvo lugar hasta hace unos pocos años con el desarrollo de los láseres y equipos de cómputo.


Partes: La fuente de luz:Generalmente emplea una fuente de luz muy poderosa (laser o lámpara de arco). Se pueden utilizar sistemas de rayos laser multi-frecuencia (en el rango ultravioleta, luz visible e infra-roja) adaptados alos tipos de marcadores fluorescentes empleados para el contraste de los elementos celulares.
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Sistema óptico: El sistema óptico de los microscopios está basado en los principios fundamentales quese mantienen inalterados, sin embargo están complementados con los avances en óptica moderna y la tecnología electrónica.
Filtros de interferencia: Incluyen espejos dicromáticos o dicroicos, barrerascon agujero de diámetro variable y diversos filtros de excitación (para seleccionar la longitud de onda de excitación del fluorocromo).
Detectores: Son fotodetectores muy sensibles a lafluorescencia emitida. Para los microscopios con múltiples rayos generalmente se usan cámaras CCD (charge- coupled device).
Computadora: Configurada con los requisitos suficientes de memoria y procesador,tarjetas de video de alta resolución, complementadas con software de captura, análisis y procesamiento de imágenes, así como también de impresoras de muy alta calidad

Funcionamiento:se basa en eliminarla luz reflejada o fluorescente procedente de los planos fuera de foco. Para ello se ilumina una pequeña zona de la muestra y se toma el haz luminoso que proviene del plano focal, eliminándose loshaces procedentes de los planos inferiores y superiores (Boyde, 1988). La luz procedente de un láser es reflejada mediante un espejo dicroico, y con la lente de un objetivo es enfocada en un punto de...