Microscopio Ptico

Práctica 1:
El Microscopio Óptico.
Observación
Microscópica de los
Organismos

Tipos de microscopios
Microscopio óptico

Microscopio electrónico

Campo luminoso

de Transmisión (TEM)

Campo oscuro

de Barrido (SEM)

Contraste de fases
Interferencia
Fluorescencia
Polarización

Microscopio de ca mpo luminoso
! El campo de observación se encuentra iluminado; los
microorganismos aparecen másoscuros que el fondo
debido a que absorben luz.
! Partes del microscopio óptico.
! Amplificación: La amplificación de un microscopio es el
producto de número de aumentos del objetivo por los del
ocular. Aumentos útiles: x1000 a x2000
! Poder de resolución: capacidad de una lente para
mostrar dos objetos muy cercanos como distintos,
discretos y separados.
! Apertura Numérica (AN): expresión matemáticaque
describe la forma en que la luz es concentrada por el
condensador y captada por el objetivo. AN = n x sen θ
■
■

n = índice de refracción del medio entre las lentes y la muestra
(1.0 para el aire; 1.56 para el aceite de inmersión).
θ = ángulo formado por el eje óptico y los rayos de luz más
externos que son captados por el objetivo

Microscopio de ca mpo luminoso
! Límite de resolución (d):distancia más pequeña por
la cual dos objetos pueden estar separados y ser
todavía distinguibles como dos objetos separados.
" d, depende de la AN y de la longitud de onda de la luz
empleada:
d = λ / (AN obj + AN cond) = λ / (2AN)
" Formas de reducir el límite de resolución:
#Disminuyendo la longitud de onda.
#Aumentando la Apertura Numérica.

" El límite de resolución máximo que se consigue en
losmicroscopios de campo luminoso se sitúa en
0.22-0.25 µm.

Microscopio de ca mpo luminoso
! Área de campo: diámetro de la parte de la preparación
que se está viendo al microscopio.
! Profundidad de campo: espesor de la preparación
enfocada en cualquier momento (mayor a pequeños
aumentos).
! Distancia focal: es la relación existente entre la
longitud del tubo del microscopio empleado y laamplificación usada en un momento dado.

Longitud del tubo
DF =
Amplificacion
! Distancia de trabajo: espacio existente entre el punto
más bajo del objetivo y el objeto enfocado.
! Características de los objetivos. Resumen.

Observación de muestras
al microscopio óptico

• Epidermis de cebolla
• Hoja de musgo
• Pulpa de tomate

Microscopía de cam po luminoso
Profase

Anafase
Metafase

Telofase
Micrografíade un squash de
meristemo apical radical de
cebolla teñido con orceína
mostrando distintas fases de la
mitosis.

Oculares
Portaobjetos cruzado acoplable
Brazo
Tubo binocular
Revolver
Objetivos
Platina portaobjetos
Condensador
Mandos movimiento de la platina
Diafrag ma iris
Filtro
Iluminación por proyección
Base o pie
Mandos de ajuste fino y grueso

Fotografía del cabezal binocular de unmicroscopio.

Vista lateral del revolver con los objetivos enroscados

Vista inferior del revolver, pieza donde se
enroscan los objetivos de un microscopio.

Fotografía de la platina. Se observan la
platina móvil, los tornillos de
movimiento de la platina móvil, y los
tornillos macro y micrométrico.
Objetivos
Platina móvil

Condensador

Platina

Fuente luminosa

Tornillos macro y
micrométricoTornillos de movimiento de la platina móvil

Platina móvil

Platina

Condensador
Fuente luminosa

Tornillos de movimiento de la platina móvil

Fotografía lateral de la platina. Se
observan la platina móvil, los tornillos
de movimiento de la platina móvil, y
los tornillos macro y micrométrico.

Tornillos macro y
micrométrico

Platina
Condensador

Diafragma iris

Fuente luminosa

Detalle del condensadory la
fuente luminosa.

Tornillos de movimiento de la platina móvil

Amplificación en un sistema de dos lentes
Imagen
virtual
Imagen real
formada por
el objetivo
Ocular (invertida)

Ojo

Condensador

Objetivo

Muestra

Refracción de la luz a través del
aire y del aceite de inmersión-1

Eje óptico

Rayos de luz
refractados
Lente objetivo
Portaobjetos
Aceite

Condensador

Aire

Refracción de la...