Microscopio

ANALISIS DE AGUA POR METODO DE FILTRACIÓN POR MEMBRANA.

MATERIALES
Muestra de agua del grifo o de alguna otra fuente
Pipetas 10, 5, y 1 mL
Tubos con 9 mL
De agua destilada estéril
Mechero con alcohol
Micropipetas de 100 uL
Cajas de petri desechables
Almohadillas estériles
Incubadora a 35 °C
Pinzas.
Sistema de Filtración por membrana Millipore
Membicino de Nitrocel ilnço de 045 Y0.7 micros
Bomba de vacío
Agua destilado estéril
Ampolletas con medio MF-ENDO. M-FC. KF-Agar. M-HPC y Medio para mohos y levaduras

PROCEDIMIFNTO
Esta práctica se divide en tres partes

1 Selección del volumen de muestra a filtrar
2. Preparación de diluciones
3. Procedimiento general para la filtración de las muestras

SELECCIÓN DEL VOLUMEN A FILTRAR
En la siguiente tabla sepresentan los volúmenes en mL de muestra sugerida para filtrar seleccione la cantidad de muestra a utilizar dependiendo del tipo de agua.
PREPARACIÓN DE DILUCIONES Si la muestra está en un rango de 100 y 1 mL se introduce directamente en la parte superior de la torres de filtración habiendo añadido primero 20-30 mL de agua estéril cuando se trate de volúmenes pequeños.
FUENTE DE LA MUESTRA |COUFOR MES
TOTALES | COUFORMES
FECALES | ESTREPTOCO
COS FECALES |
AGUA POTABLE | 100 | -—------ | NA |
POZOS MANANTIALES LAGOS.EMBALSES | 0.5, 6.0, 100, 4, 1. 5, 6.0, 100 | 30. 100
10,30,100 | NA |
ABASTECIMIENTO | 0.08, 0.15 | 0.1. 0.3 | NA |
DEAGUAYPLAYA | 0.5. 1.4 | 1.3, 10 | |
RIOS Y DESCARGAS | 0.003. 0.01 | 0.01. 0.03 | NA |
CLORINADAS| 0.02, 0.08 | 0.1,0.3.1 | |
DESCARGAS CRUDAS | 0.0001, 0.0003.
0.001. 0.003,01 | 0.0003,0.001,0.003,
0.01, 0.03 | NA |

• Las muestras de agua potable y de descargas clorinadas se le deben adicionar tiosulfato de sodio al 10% (0.1 ml por 100 mL de muestra).
Cuando se requieran volúmenes menores de 1 mL se hacen diluciones en agua estéril. Para realizar estas, se procedede lo siguiente forma:
• Para realizar una dilución 10:1. Transfiera asépticamente con uno pipeta estéril 1 ml de la muestra 0 9 ml de agua estéril y mézclelo. Remuevo 1 ml de esta dilución para filtrar. Ese volumen representa 0.1 ml de lo muestra original (10-1). Remueva 0.5 ml de dilución. Esto equivale o 0.05 ml de la muestro Original (1:20).
• Para realizar un dilución 10-2 transfieraasépticamente 1 ml de la dilución 10-10 un tubo conteniendo 9 ml de agua estéril. Remueva 1 ml de la dilución para filtrar. Ese volumen representa 0.01 ml de la muestra original (1:100). Remueva 0.5 ml de lo dilución. Eso equivale a 0.005 ml de la muestra original (1:200). Por otro lado, puede transferir 1 ml de la dilución 10-2 a un tubo conteniendo 9 ml de agua estéril. Obtendrá uno dilución 1 Conesta técnica básica cualquier método es posible.
PROCEDIMIENTO GENERAL PARA LA FILTRACION DE LAS MUESTRAS
Para asegurar que no existe contaminación al comenzar las pruebas se debe someter 100 ml de agua estéril al procedimiento de filtración por membrana antes de iniciar el procedimiento de las muestras de agua.
Para filtrar las muestras arme el equipo de filtración, así:
• Laalmohadilla absorbente estéril se coloca asépticamente en el fondo de una caja plástico de petri estéril.
• La almohadilla absorbente se saturo con el medio de cultivo respectivo contenido en una ampolleta.
• Un disco de filtro de membranas estéril se coloca sobre el receptáculo con uno pinza estéril. Para coliformes fecales, se uso la membrana de 0,7 micras y para los otros análisis, la de 0.45micras.
• La muestra de agua o su dilución, se vierte dentro del embudo montado utilizando una bomba de vacío. Luego lavar con 20 ml de agua destilada estéril. Una vez filtrado. Apague el vacío y permita
que la presión en el interior de la torre iguale la presión exterior. Este paso debe hacerse poco a poco permitiendo la entrada de aire en la base de la torre. Nunca debe retirarse la parte...