microscopio

Microscopio – instrumento que permite amplificar la imagen de un objeto o de un ser pequeño (micros: pequeño y scopein: ver); inventado 1610 por Galileo, el primer científico italiano observando el exterior de una abeja o Jansen, el holandés.

Fundamento – Si se sitúa entre el ojo y el objeto un sistema óptico capaz de aumentar el angulo visual, se podrá ver el objeto con mayor amplitud yclaridad. El sistema de lentes - produce una imagen aumentada de una muestra diminuta. El objetivo - pequeña lente de proyección que aumenta y proyecta la imagen primaria del objeto hacia el extremo superior del tubo del microscopio (imagen aérea). El ocular (lupa) - aumentando la imagen aérea. La imagen final - se forma en la retina del ojo. La imagen virtual (el ojo percibe la imagen final en elplano virtual).

Aumento – es el numero de veces que se ve el tamaño de un objeto por encima de su valor real. En el microscopio óptico compuesto, se calcula multiplicando el aumento individual del objetivo por el aumento individual del ocular. Objetivo - x4, x10, x40, x100. Aumento óptico ocular - x5, x10
Resolución – la capacidad del microscopio para mostrar los detalles más finos de un objeto.Poder de resolución (limite de resolución o distancia resoluble) – la distancia minima entre dos puntos que permite distinguirlos como tales (la capacidad de microscopio para distinguir 2 puntos separados aunque están muy próximos entre si).
Disminuir la distancia resoluble = aumentar el poder de resolución = aumentar la apertura numérica (AN) = disminuir la longitud de onda de la luz empleada =aumentar el ángulo alpha en el espacio objeto = aumentar el índice de refracción (IR) en el espacio objeto (rellenar el espacio existente entre la muestra y el objetivo con una sustancia de mayor índice de refracción, como aceite).

Numero de campo – diámetro de la imagen observada a través del ocular (en mm).
Profundidad de foco – el espesor de la muestra que es posible tener enfocado porcompleto >< aumento y AN (apertura numérica) de la lente.

El contraste – para mejorarlo, disminuye el cono de iluminación (se controla mediante el diafragma de apertura) procedente del condensador.

Partes de un microscopio óptico compuesto:
Parte mecánica – sistema de soporte o estático (pie, brazo, cabezal); sistema de ajuste (anillo de ajuste de las dioptrías, tornillo de fijación delcabezal, tornillos reguladores de la platina, tornillo de elevación del condensador, tornillos de centrado del condensador, tornillo de seguridad del condensador, control del diafragma de apertura del condensador, anillos de enfoque macro-métrico y micrométrico, control de ajuste de la claridad/ la luz).
Parte óptica – sistema de iluminación (fuente de luz - lampara halogena de intensidad graduable;condensador - dispositivo que contiene una lente que concentra la luz, generada en la lampara, hacia la preparación; diafragma de apertura - el control adecuado del cono de iluminación que atraviesa la muestra y entra en el objetivo = se ajusta AN); lentes (objetivos - generan imagen real, invertida y aumentada del objeto; oculares - captan la imagen formada por el objetivo y la amplian)Material necesario para la visualización microscópica – portaobjetos esmerilado y biselado, cubreobjetos 22x22, líquido de inmersión (se usa sin cubreobjetos) es imprescindible cuando se observa muestra desecada con objetivo de 100x (tradicionalmente aceite de madera de cedro, actualmente aceites sintético)

Tipos de microscopios:
Microscopio de campo oscuro – si dentro de la muestra hay elementostransparentes, con un indice de refracción diferente al del medio que los circunda, la luz es difractada e incide sobre el objetivo y pueden ser visualizados; permite la observación de seres microscópicos transparentes y no teñidos (Treponema pallidum – preparación en fresco).

Microscopio de fluorescencia – consta de una fuente de luz muy intensa (lámpara de Hg a alta presión), emite una...